测定奶粉中蛋白质的真实含量VIP免费

凯氏定氮法测奶粉中真实蛋白质的含量摘要实验用凯氏定氮法测定奶粉中的蛋白质含量，将硫酸及催化剂与奶粉一同加热消化，使蛋白质分解，其中C、H形成CO2、H2O逸出，而氮以氨的形式与硫酸作用，形成硫酸铵留在酸液中。然后将消化液碱化，蒸馏，使氨游离，用水蒸气蒸出，被硼酸吸收。用标准盐酸溶液滴定所生成的硼酸铵，消耗的盐酸标准液计算出总氮量，再折算为粗蛋白含量。关键词:凯氏定氮法蛋白质消化蒸馏1前言：劣质奶粉的出现严重地损害了人民群众的健康,劣质奶粉的主要特点是蛋白质含量远低于正常值。正是利用氮与蛋白质含量间的关系，实验室测定蛋白质的非直接性，一些不法人士钻了蛋白质中氮的含量。他们利用三聚氰胺含有很高的氮，将三聚氰胺残掺杂近奶粉中以提高奶粉的蛋白质含量。而长期饮用这些蛋白质含量极低的奶粉，首先会导致婴儿严重营养不良，随后会引起各种并发症，在外来细菌的侵袭之下，婴儿几乎完全丧失了自身的免疫能力，病情发展十分迅速，最后婴儿头部严重水肿，几乎看不清五官，全身皮肤也出现了大面积的高度溃烂，伤口长时间无法愈合，最后导致呼吸衰竭而死亡。因此，测定奶粉中蛋白质含量，对掌握其营养价值和品质的变化，保障人体的健康，合理配料，为乳制品深加工提供数据十分重要，此外，蛋白质分解产物对乳制品的色、香、味都有一定的作用，所以测定具有深远意义。2实验目的（1）学习凯氏定氮法的测定蛋白质的原理；（2）掌握凯氏定氮法的操作技术，包括样品的消化处理、蒸馏、滴定及蛋白质含量的计算等。3实验原理各种天然有机物的含氮量通常用微量凯氏定氮法（micro-Kjeldahlmethod）来测定。当有机含氮化合物与浓硫酸共热消化，氮转化为氨，氨与硫酸结合成硫酸铵。消化产生的硫酸铵在蒸馏过程中与强碱（40%氢氧化钠）反应，放出氨。氨被带指示剂的硼酸吸收后，用标准盐酸溶液滴定。根据标准盐酸的消耗量可以计算样品的总氮量。反应式如下：消化：含氮有机物+H2SO4→CO2+H2O+NH3↑12NH3+H2SO4→（NH4）2SO4蒸馏：（NH4）2SO4+2NaOH→H2O+2NH3+Na2SO42NH3+4HBO3（带指示剂）→（NH4）2B4O7+5H2O酒红色鲜绿色滴定：（NH4）2B4O7+2HCL+5H2O→2NH4CL+4H3BO4鲜绿色淡紫色消化过程时间较长，为加速反应，在消化时常加入硫酸钾与硫酸铜混合粉末来促进。期中硫酸钾与硫酸作用生成硫酸氢钾，可以提高溶液的沸点（一般纯硫酸的沸点在340℃左右，而添加硫酸钾后可是温度提高到400℃以上），提高反应温度，从而加快有机物的分解。硫酸铜起催化作用。在凯式定氮中可用的催化剂的种类很多，出硫酸铜外，还有氧化汞、硒粉、二氧化钛等，但综合价格、效果及环境污染等因素，硫酸铜的应用最为广泛。微量凯氏定氮法蒸馏样品时每次适合0.2~1.0mg的氮含量。4.实验设备凯氏烧瓶、移液管、酸式滴定管、电炉、容量瓶、凯氏定氮蒸馏装置5实验材料和试剂材料奶粉一包试剂浓硫酸（AR）；硫酸钾-硫酸铜混合物（K2SO4：CuSO4·5H2O=3:1、6:1或10:1）；40%氢氧化钠溶液；2%硼酸溶液；0.01mol/L标准盐酸（要标定）；甲基红-溴甲酚绿混合指示剂：5份0.2%溴甲酚绿溶液（含95%乙醇）与一份0.2%甲基红乙醇溶液混合；2%硼酸指示剂混合液（2%硼酸溶液100mL，加混合指示剂1mL）。6操作步骤6.1消化称取0.1~0.5g样品于50mL干燥的凯氏烧瓶内，加入硫酸钾-硫酸铜混合粉末0.3~0.5g，再加入浓硫酸5mL。用消化炉加热，在通风橱中消化，瓶口加一小漏斗。先以文火加热，避免泡沫飞溅，不能让泡沫上升到瓶颈，待泡沫停止发生后，加强火力保持瓶内液体沸腾。时常转动烧瓶使样品全部消化完全，直至消化液清澈透明。另取凯氏烧瓶一个，不加样品，其它操作相同，作为空白试验，用以测定试剂中可能含有的微量含氮物质，以对样品进行校正。将凯氏烧瓶中的待测样品及空白消化液冷却后，分别转入100mL的容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，备用。6.2蒸馏2按下图所示安装微量凯氏定氮装置。将微量凯氏定氮蒸馏仪洗涤，先用自来水清洗，再用蒸汽蒸洗至流出液不能使带指示剂的硼酸明显变色。关闭电源，放空蒸馏瓶中的热水待蒸馏瓶冷至室温后加样品蒸馏。取一只三角瓶，加入硼酸-知识剂混合液10mL,置于冷凝管端口下，...