·682。安徽医科大学学报ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2007Dec：42(6)SMN基因诊断小儿脊髓性肌萎缩症金岚。，尹耕心，吴德。，李小燕。，唐久来。摘要目的了解儿童期发作的进行性脊髓性肌萎缩(SMA)患者的运动神经元存活基因(SMN)的缺失，探讨聚合酶链反应一限制性片段长度多态性(PCR—RFLP)方法用于SMA疾病的诊断价值。方法应用PCR—RFLP方法对3例SMA可疑患儿及其父母5例的SMNI基因外显子7和8进行了检测，并对其进行基因测序。结果3例SMA可疑患儿中3例均有SMNI基因缺失，为外显子7和8联合缺失。其父母均无SMNI基因缺失。基因测序支持诊断。结论用PCR—RFLP法对高度可疑儿童型SMA的病例进行诊断，具有较高敏感性和特异性，简便易行。主题词肌萎缩，脊髓性／遗传学；运动神经元；基因缺失中图分类号R338．1；R746．4文献标识码A文章编号1000—1492(2007)06—0682—04脊髓性肌萎缩(spinalmusculuratrophy，SMA)是以脊髓前角仅运动神经元变性为主要病变的常染色体隐性遗传病，儿童型SMA的基因定位于5q13。1995年在该区克隆到的运动神经元生存基因(survivalmotorneurongene，SMN)被认为是儿2007一l1一l6接收作者单位：安徽医科大学第一附属医院,'bid神经康复中心，合肥230o22安徽省计划生育研究所，合肥23001l作者简介：金岚，女，硕士研究生；唐久来，男，教授，硕士生导师，责任作者，E—mail：tan西i—ulai8888@2】cn。com童型SMA的致病基因。SMN基因在1条染色体上具有2个高度同源的拷贝，在端粒侧称SMN1，是功能基因；位于着丝粒侧称SMN2。SMN1基因缺失是儿童型SMA发病的主要原因。1995年，Lefebvreet0终于克隆到SMA基因，研究表明J，SMN1第7、8号外显子在98．6％的SMA患儿中纯合缺失或截断。这使得检测SMN1缺失进行本病的基因诊断成为可能。我们采用错配引物复合聚合酶链反应一限制性片段长度多态(PCR—RFLP)技术诊断并进行基因测序了3例SMA患儿及其父母。报道如下。1对象和方法1．1研究对象儿童型SMA可疑患者3例及其父母5例，父母5例表型正常，3例患儿临床表现及辅助检查结果见表1。1．2PCR·RFLP方法1．2．1模板DNA制备取患儿及其父母静脉抗凝血各1ml，盐析法提取DNA，一20℃保存。1．2．2PCR扩增①引物序列为：SMN1外显子7引物：5『_AGACTATCAACTI'AATIq'CTGATCA一3’和错配引物5一CCTI'CCTFC1唧G^tI]一3。SMN1外显子8引物：5一GTAATAACCAAATGCAATGTGAA一3和5一cTAcAAcAcccTI℃TcAcAG一3。(PCR扩增反应体系为50，内含基因组DNA50～100ng，Clinicalcharacteristicsofnon-syndromicoligodontiaCuiJuanjuan，MeiLingxuan，LiWuli(CollegeofStomatology，AnhuiMedicalUniversity，Hefei230032)AbstractObjectiveToexploreclinicalcharacteristicsandconditionofcongenitaloligodontia．MethodsThepatientsofno—syndromicoligodontiawereselectedandexaminedwithoralcavityandsystem，thenweretakenbypanoramicradiographandanalyzedstatistically．ResultsThepatientshadallkindsofclinicalmanifestation．Someofthemhadfamilyhistory，whileothersdidnthave．Atthesametime，someagenesispatientshadobviousabnormityconformationoftheirteeth．Theconditioncanbeinheritedasanautosomedominantmainlyandaancestrywithan—tosome—recessive．ConclusionThecongenitalteethagenesismailyisautosomaldominantinheritantdisease．Theinheritantappearancesincludethedeletedtoothnumberandcrownshape．CongenitalteethagenesisinfluencesoralheaJthandocclusion．MeSHtoothloss／longenital；tothloss／genetics；pedigree维普资讯http://www.cqvip.com安徽医科大学学报ActaUniversitatL~MedicinalisAnhui2007Dec；42(6)683+：有；一：尤；CPK为磷酸肌酸激酶dNTPs200I~moL／L，引物25pmol／L，10×bufer5Ixl，Taq酶2．5u。置PCR扩增仪上，94℃预变性5min，95℃15S，57oC30S，72oC30S，循环40个周期。最后72℃保温8min。1．2．3酶切酶切体系30斗l，取每例PCR产物15ul，分别加入DraI和DdeI酶6U及相应的buffer，置37℃水浴消化3h15min，反应终I卜。1．2．4电泳分析取20“l，住4％...
