一、检测细菌或其抗原(一)直接涂片显微镜检查自病人标本直接涂片作染色镜检是简便而快速的方法之一
自一定部位采集标本作直接检查需考虑细菌的形态特征与可能存在的细菌数量
脑膜炎患者的脑脊液和瘀斑刺破涂片,常可显示在细胞内的革兰氏阴性肾形双球菌,有诊断价值
白喉患者咽部假膜涂片中可见典型的杆菌有时可有异染颗粒,也有参考诊断价值
结核患者痰直接或浓集后,涂片抗酸染色检出结核杆菌有诊断价值
在少数情况下,也有利用免疫荧光或酶标记抗体染色镜检方法进行快速诊断,如粪例中的霍乱弧菌、痢疾杆菌等,可用这种技术检出
(二)培养大多数病菌的形态与染色并无特征,因此需用培养方法来分离与鉴定细菌
虽然这一方法需要的时间较长,但比较可靠
此外,只有通过这一方法才能获得细菌的纯培养,可用于做药敏试验或毒力试验
应根据不同细菌需要的营养、生长条件(如厌氧或CO2)、菌落生长特征来初步识别细菌
如溶血性链球菌需在血琼脂平板上生长,菌落小而透明,菌落周围有完全溶血圈,可资鉴别
多数细菌欲确定为何种病原菌尚需进一步获得纯培养及接种各种特殊培养基进行生化反应试验或确定其抗原性与致病力等
(三)生化反应细菌的合成与分解代谢过程中,能通过酶利用一些物质或分解一些物质
不同的细菌具有不同的酶,因此各种细菌能够利用与分解的物质也各不相同
利用各种细菌的不同生化反应帮助鉴别细菌在某些细菌如肠道杆菌中是很重要的步骤
例如肠道杆菌均为革兰氏阴性杆菌
菌落形态亦相似,但对于糖的发酵结果不同,因此可利用不同种糖作为培养基质进行生化反应予以区别
(四)抗原检测与分析有些细菌即使用生化反应变难区别,但其细菌抗原成份(包括菌体抗原、鞭毛抗原)却不同
利用已知的特异抗体测定有无相应的细菌抗原可以确定菌种或菌型
常用的方法为玻片凝集反应,用已知的特异免疫血清与待鉴定的细菌在玻片上做凝集反应,如出现凝集菌团则为阳性,说明该菌有相应的特异抗原