山西大学本科实验报告学院生命科学学院学生姓名钟日龙专业生物工程学号2009316044年级2009级指导教师李翠兰教务处制表二Ο一一年十二月二十日外来化合物对细胞生理代谢的影响——急性ZnCl2染毒对小麦幼苗SOD活力影响钟日龙（山西大学生命科学学院山西太原030006）摘要：本实验以急性ZnCl2和小麦幼苗为实验材料，研究了不同浓度(ZnCl2的浓度分别是100mg/mL、200mg/mL、400mg/mL、800mg/mL、1600mg/mL)对小麦幼苗生理活性的影响，初步阐明了Zn+2对小麦幼苗的毒害机理。结果表明，结果以浓度400mg/mL处理最佳,能够显著促进小麦根系的生长,根长、根重和根系活力分别比对照显著提高。在Zn+2胁迫下，随处理浓度的升高，小麦幼苗叶片中超氧化物歧化酶(SOD)活性呈上下波动的趋势。通过对各组SOD值的分析可知，浓度小于100mg/L的Zn+2促进SOD同工酶的表达，浓度大于800mg/L的Zn+2抑制SOD同工酶的表达，中间浓度呈波动性影响，低浓度的ZnCl2可诱导小麦幼苗SOD的表达，而高浓度的ZnCl2会抑制SOD的活性。关键词：外来化合物；ZnCl2；小麦幼苗组织；SOD酶活性1.材料与方法1.1实验材料1.1.1材料：小麦幼苗:实验室固体培养基中培养1.1.2试剂：0.05mol/lPBS缓冲液（PH7.0）SOD试剂盒冰醋酸5个不同浓度ZnCl2溶液（100mg/l200mg/l400mg/l800mg/l1600mg/l）1.1.3器材：离心机分光光度计天平恒温水浴锅冰浴微量移液器（100ul50ul）研钵离心管一次性塑料管1.2实验方法1.2.1ZnCl2染毒处理实验及粗酶提取液的制备浸种5-6h，萌发24-36h后将露白的种子随机摆放于培养皿中，30-40粒/皿左右，生长7天后，分别用不同浓度的ZnCl2溶液处理9天后，取茎叶0.2-0.3g，按1:20加入遇冷的PBS液（1/3用于研磨，2/3用于清洗，小范围研磨，便于冲洗），冰浴研磨，倒入离心管，并用剩余的PBS液冲洗入离心管。8000rpm离心15min，上清液即为5%的粗酶提取液，用于SOD酶活性的测定。1.2.2总SOD酶活力测定（按下表进行）试剂测定管（4个）对照管（1个）SOD试剂11ml1ml粗酶提取液40ul--蒸馏水--40ulSOD试剂20.1ml0.1mlSOD试剂30.1ml0.1mlSOD试剂40.1ml0.1ml充分摇匀，置37℃水浴40min显色剂2ml2ml混匀，室温放置10min，于波长550nm处，1cm光径比色杯，蒸馏水调零，比色，测定各管OD值。2.结果与分析2.1小麦茎叶SOD酶活力测定结果注：1%的粗酶提取液稀释倍数为100倍/g第一组小麦茎叶SOD酶活力测定结果（0mg/lZnCl2处理9天）（表1）测定管（4个）对照管1个1234OD值1.1521.1501.1671.1401.167总SOD酶活力（u/g）0.967×1021.096×1021.096×1021.741×102SOD平均值±标准差(1.225±0.349)×102第二组小麦茎叶SOD酶活力测定结果（100mg/lZnCl2处理9天）（表2）测定管（4个）对照管1个1234OD值1.0891.0161.0301.0521.163总SOD酶活力（u/g）4.788×1029.511×1028.606×1027.182×102SOD平均值±标准差(7.522±2.059)×102第三组小麦茎叶SOD酶活力测定结果（200mg/lZnCl2处理9天）（表3）测定管（4个）对照管1个1234OD值1.1461.1461.1441.1351.165总SOD酶活力（u/g）1.227×1021.227×1021.356×1021.938×102SOD平均值±标准差(1.437±0.339)×102第四组小麦茎叶SOD酶活力测定结果（400mg/lZnCl2处理9天）（表4）测定管（4个）对照管1个1234OD值0.9540.9390.9940.9841.241总SOD酶活力（u/g）17.403×10218.312×10214.977×10215.584×102SOD平均值±标准差(16.569±1.553)×102第五组小麦茎叶SOD酶活力测定结果（800mg/lZnCl2处理9天）（表5）测定管（4个）对照管1个1234OD值1.0060.9960.9930.9721.160总SOD酶活力（u/g）4.995×1025.319×1025.417×1026.098×102SOD平均值±标准差(5.457±0.464)×102第六组小麦茎叶SOD酶活力测定结果（1600mg/lZnCl2处理9天）（表6）测定管（4个）对照管1个1234OD值1.0551.0611.0611.0731.284总SOD酶活力（u/g）6.710×1026.535×1025.714×1026.183×102SOD平均值±标准差(6.286±0.440)×102不同浓度ZnCl2处理后小麦茎叶总SOD酶活性（表7）ZnCl2浓度（mg/L）各重复的SOD总活力（U）总SOD平均值±标准差12340（对照组）96.72109.62109.62174.10(1.225±0.349)×102100478.80951.14860.55718.21(7.522...
