谷氨酰胺和丙氨酰一谷氨酰胺双肽影响人回结肠粘膜增殖的离体实验VIP免费

第10卷第1期2002年3月中国临床营养杂志CHINESEJOURNALOFCLINICALNLTRITIONV0llO．N0．1March．2002国外论著谷氨酰胺和丙氨酰一谷氨酰胺双肽影响人回结肠粘膜增殖的离体实验EfectofGlutamineandGlutaraineDipeptideonMucosaloftheHumanIleumandColoninvitroPeterStehlePeterFuerst．“DepadmenlofMedicineUniversityWi~rzburg．Worzbutg；andhr~tituleforBiologicalChemist~'andNutrilionUnive~ilyofHohenheira．Hohenheim，Germany)摘要背景／目的各氨酰胺(Gin)对危重患者小肠上皮有一定营养作用在肠l，}营养时由于其不够稳定而限制了它的应用，但此不足可通过使用稳定的丙氨酰一替氨酰胺双肽(Ala．Gin)而克服。本研究目的是验证如下假设，即答氨酰胺或丙氨酰一各氨酰胺双腱不但可刺激回肠细胞增殖，而且可刺激结肠细胞增殖，维护肠屏障功能方法将正常』、回肠、近段结肠、乙状结肠及直肠活检标率分别加人各氨酰胺(2rmnol／L)、丙氨酰一各氨酰胺双肽(2nunol／L)、生理盐水(对照)，孵育4小时s期的细胞用5溴·2脱氧尿苷标记。对被标记的腺管纵向切片和静止期细胞进行记教结果答氨酰氨和丙氨酰一备氨酰瞎双肽可刺激回肠细胞、近段结肠乙状结肠及直肠腺管细胞的增殖在回肠标率，整个腺管的细胞均被较好的标记，而在结肠则主要对腺管的基底部分有营养作用结论谷氨酰胺或丙氨酰～各氨酰胺双肚不但对回肠细胞．而且对鲒肠细胞有营养作用．从而可阻止肠外营养时肠粘膜萎缩，维护肠屏障功能。关键词各氨酰胺丙氨酰一答氨酰胺双肽回结肠中国分类号Q517文献标识码A文章编号1008．5882(2002)01·0001·05谷氨酰胺(Gin)是人体内游离氨基酸池和血浆中含量最丰富的氨基酸。人体内约80％的谷氨酰胺分布在骨髂肌，其浓度是血浆的3O倍ll1肠道细胞消耗的能量主要来源于骨骼肌中释放的谷氨酰胺J。尽管在正常情况下谷氨酰胺为非必需氨基酸，但对于危重和营养不良患者，谷氨酰胺为条件必需氨基酸I。在诸如手术、创伤脓毒症等危重情况下，细胞内的谷氨酰胺浓度降低，体内各氨酰胺将很快耗竭】。体内谷氨酰胺池的耗竭会导致小肠上皮细胞的萎缩，并可能损害肠屏障功能，促进细菌移位]。尽管给危重和营养不良患者补充谷氨酰胺在生理上具有必要性，但由于谷氨酰胺在高温消毒和存储时不稳定，故尚无可供临床应用的商品。虽然可通过在输注商用氨基酸溶液时加入结晶氨基酸的方式提供游离谷氨酰胺，然需每日在药房无菌问配液及膜滤过消毒。谷氨酰胺的不稳定性可通过使用稳定且易溶的丙氨酰一谷氨酰胺双肽。t1,121和甘氨酰一谷氨酰胺双肽加以克服。不同实验条件的结果表明，谷氨酰胺对小肠有营养作用14,151，然而其对结肠枯膜的影响却知之甚少。Roedigert研究发现，近段结肠与回肠主要以谷胺酰胺为营养，而远段结肠主要依赖于碳水化合物经细菌发酵后产生的丁酸盐。本研究提出了两个问题：(1)谷氨酰胺是否不仅刺激回肠腺管细胞增殖，并同样作用于结肠?(2)稳定的丙氨酰一谷氨酰胺双肽能否产生与游离谷氨酰胺同样的效果?材料和方法使用CF10L型奥林巴斯纤微结肠镜取正常枯膜的活检标本。活检标本分别取自回肠末端(距回盲瓣10cm以内)、升结肠和乙状结肠(距肛缘15—20em)。这10例镜检患者为腹痛待查或大便潜血试验阳性者，其中男性6例，女性4例；平均年龄(52．8+5．59)岁(2704岁)。内镜所见主要为痔疮，对患有炎性肠病或良恶性肿瘤者以及血小板计数异常等凝血功能障碍者予以排除。镜检前夜禁食并I：1服Golytely液行肠道准备。每位患者均获知情同意。将取白3个不同部位的活检标本立即浸入含有维普资讯http://www.cqvip.com2中国临床营养杂志1O卷EWe液、胎牛血清(10％vol／vo1)、抗生素混合液(cibco，P丑isl掣，Scotland)的塑料瓶内。胎牛血清内含有少量的醋酸盐(约20p．mol／L)，不会影响细胞的增殖。3个不同部位的标本均在15分钟内送到实验室开始孵育，并分别置于含有3上述溶液的细胞培养皿的滤纸上，然后在底物中分别加入2mmol／LGin(SigmaChemicalCo，StLouis，MO：由于其不稳定颓临时配用)，2mmol／LAla—GlnII，2mmol／LNaCI(对照组)。此研究设计可使取自不同部位的标本在不同干预条件下具有可比性。孵育持续4小时，足...