收稿:2006年1月,收修改稿:2006年5月*通讯联系人e-mail:amylee0289@163.com亲水作用色谱及其在碱性药物分析中的应用李瑞萍1*黄骏雄2(1.三峡大学AlanG.MacDiarmid再生能源研究所宜昌443002;2.中国科学院生态环境研究中心环境化学与生态毒理学重点实验室北京100085)摘要亲水作用色谱是采用极性固定相、高含量极性有机溶剂-水相缓冲液为流动相的一种分离技术,它能有效地保留反相色谱中保留弱或不保留的强极性碱性药物。本文综述了以未键合硅胶为固定相的亲水作用色谱分离碱性药物的机理、特点及其应用的最新进展。关键词亲水作用色谱碱性药物分离中图分类号:O657.7;O657.63文献标识码:A文章编号:1005-281X(2006)11-1508-06HydrophilicInteractionChromatographyandItsApplicationsintheSeparationofBasicDrugsLiRuiping1*HuangJunxiong2(1.AlanG.MacDiarmidResearchInstituteofRenewableEnergy,ChineseThreeGorgesUniversity,Yichang443002,China;2.StateKeyLaboratoryofEnvironmentalChemistryandEcotoxicology,ResearchCenterforEco-EnvironmentalSciences,ChineseAcademyofSciences,Beijing100085,China)AbstractHydrophilicinteractionchromatography(HILIC)isaconvenientmethodforseparatingbasicdrugsandtheirmetaboliteswhichhavepoorretentiononreversed-phasecolumnbypassinghighlypolarorganic-aqueousbuffermobilephaseacrossapolarstationaryphase.ThemechanismandcharacterizationofHILICusingsilicacolumnPreversed-phaseelutionsystemaredescribed.Inaddition,therecentprogressofitsapplicationsintheseparationofbasicpharmaceuticalsisreviewed.Keywordshydrophilicinteractionchromatography;basicdrugs;separation1引言碱性药物的分离一直是色谱界研究的热点。其原因之一是在日益发展的制药业中,很多新开发的药物为强碱性化合物,其药效和纯度的评价需用色谱法。为得到碱性药物理想的色谱行为,人们不断开发新的色谱填料及分离模式以满足其需求。目前,以硅胶为基质的各种化学键合填料为固定相的反相色谱仍占碱性药物分离的主导地位。但由于键合不完全,碱性化合物常与残留的硅羟基发生作用[1,2],致使峰形严重拖尾。而且强极性碱性化合物的亲水性很强,在酸性pH条件下它们带的净电荷使这些化合物用反相色谱很难保留和分离。因此必须采用二次化学平衡的原理,利用离子对色谱、离子抑制或硅羟基掩蔽剂等,以保证良好的分离效果。但这些洗脱条件降低质谱检测灵敏度,不能与质谱兼容[3,4]。以非极性或低极性有机溶剂为流动相、硅胶为固定相的传统正相色谱已广泛用于分离多种中性化合物,尤其适用于分离异构体[5]。然而由于极性大的碱性化合物与固定相作用强,需要高极性流动相才能将其从硅胶柱上洗脱[6]。1975年Jane[7]首次采用高浓度、高极性有机溶剂-水相缓冲液成功地分离了碱性药物。此后这种采用正相硅胶色谱柱/反相洗脱液的色谱系统引起了人们的广泛注意,第18卷第11期2006年11月化学进展PROGRESSINCHEMISTRYVol.18No.11Nov.,20061990年Alpert[8]将这种色谱模式命名为亲水作用色谱。亲水作用色谱(hydrophilicinteractionchromatography,HILIC)是一种以极性固定相(如硅胶或衍生硅胶)及含高浓度极性有机溶剂和低浓度水溶液为流动相的色谱模式。它与传统正相色谱相似,流动相的有机部分是弱溶剂,水溶液是强溶剂[8]。化合物是按亲水性增加的次序流出,但所用的溶剂又与反相色谱相似,采用与水互溶的极性有机溶剂如乙腈或甲醇;而不用传统正相色谱中所用溶剂如正己烷及氯仿,且水的含量较大,通常为5%或更高。与反相色谱分离碱性药物相比,该分离模式具有峰形对称、保留时间短、重现性好及柱寿命长等优点[4,9]。最近几年该技术又与质谱联用,应用于生物样品中碱性化合物及其代谢产物的分离与鉴定。该分离技术的优点之一就是保留一些用反相色谱无法简单保留的碱性化合物[4,10]。随着人们对HILIC的深入了解,它在碱性药物分离中的应用越来越受到研究药物代谢、药物开发和组合化学的科学家们重视,近几年的研究报道也逐渐增多。本文介绍了以硅胶为固定相的亲水作用色谱分离碱性药物的分离机理、...
