实验室环境及人体体表微生物的检测VIP专享VIP免费

实验室环境及人体体表微生物的检测（李玲艳张海满薛汝峰解制怡申传斌等）摘要：高校越来越重视对学生实践能力的培养，学生在实验室的时间和机会越来越多。然而微生物实验室不同于其他学科实验室，所面对的是一个个活的生物，而且具有不同程度的感染性。本实验项目的意义在于使学生从感官上认识自身周围存在的微生物，掌握微生物的分离、接种技术。对实验中富集的微生物采取灭菌处理，做到微生物实验室安全管理工作标准化和规范化。关键词：实验室;微生物;计数1材料与方法1.1实验材料1.1.1材料原料：马铃薯（市购）琼脂；NaOH（分析纯）天津市凯通化学试剂有限公司；牛肉浸膏天津市英博生化试剂有限公司；蛋白胨天津市凯通化学试剂有限公司；蔗糖（分析纯）上海国药集团化学试剂有限公司1.1.2主要仪器设备和试剂1.1.2.1主要仪器设备高压蒸汽灭菌锅、超净工作台、电子天平、恒温培养箱、电热恒温鼓风干燥箱、霉菌培养箱、超声波清洗器、移液器、震荡培养箱、体视显微镜等。培养基平板，无菌水，灭菌棉签（装在试管内），接种环，试管架，酒精灯，酒精瓶，记号笔，废物缸，牙签等。1.1.2.2试剂碘液、二甲苯、95%乙醇、香柏油、美蓝、结晶紫、石炭酸复红、番红、孔雀绿、棉蓝等1.1.3分离计数培养基马铃薯培养基(PDA)配比为：马铃薯200g、蔗糖20g、琼脂20g、水1000ml。牛肉膏蛋白胨培养基配比为：牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl5g、琼脂20g、水1000ml。1.1.4本实验分别进行了以下几方面的研究：实验室门、实验室窗微生物检测；学生自身微生物检测（手，头发、皮肤、唾液等）；室内空气中微生物的检测；富集微生物的处理。1.1.4.1运用垂直落下法测空气中微生物浓度。将装有牛肉膏蛋白胨培养基的平皿敞口放于空气中放置1小时，然后将其放于恒温培养箱中培养24-72小时并计数。1.1.4.2稀释平板培养计数法。将桌面上4平方厘米左右面积用灭菌棉签涂抹后运用稀释平板涂布法接种在牛肉膏蛋白胨培养基中，并于37℃下在恒温培养箱中培养24-72小时并计数。门以及人体表面微生物计数也采取这种方法。1.1.4.3菌落形态初步判断法。1.1.4.4显微观察形态和结构,分类鉴定。1.1.4.5将富集得到的微生物平板放于水中煮沸处理30min，以杀灭其中的微生物。2结果与分析2.1各实验室微生物检测147实验室：敞口平皿在空气中放置1小时后平均分布细菌73个。实验室门:1平方厘米面积平均分布细菌2000个。实验台:1平方厘米面积平均分布细菌1540个。149实验室：敞口平皿在空气中放置1小时后平均分布细菌70个。实验室门:1平方厘米面积平均分布细菌2058个。实验台:1平方厘米面积平均分布细菌2710个。151实验室:敞口平皿在空气中放置1小时后平均分布细菌93个。实验室门:1平方厘米面积平均分布细菌2006个。实验台:1平方厘米面积平均分布细菌3050个。140实验室：敞口平皿在空气中放置1小时内细菌：21个。实验室门:1平方厘米面积平均分布细菌1891个。试验台:1平方厘米面积平均分布细菌2440个。人体表面微生物检测手指表面1平方厘米面积平均分布细菌554个。手心表面1平方厘米面积平均分布细菌203个。手背表面1平方厘米面积平均分布细菌681个。衣袖口表面1平方厘米面积平均分布细菌761个。每根头发表面（长约10cm）平均分布细菌141个。每毫升唾液平均分布细菌67400个。以下是拍摄的部分照片：3讨论从实验结果可以看出，实验室环境及人体体表微生物种类多样，数量普遍较多。学校越来越重视对学生实践能力的培养，学生在实验室的时间和机会越来越多。实验室中微生物虽然危害程度较低，但缺乏基本的防范意识，大量接触也会有感染的危险。有必要让广大同学了解并非所有的微生物都是有害的，对有害微生物加强防范意识，对实验中富集的微生物采取灭菌处理，做到微生物实验室安全管理工作标准化和规范化，同时加强学生对微生物实验无菌操作的认识，合理处理实验材料，确保实验结果的准确性，同时为师生营造一个绿色的实验环境，尽可能减少污染。参考文献：（1）鞠晓红.高等院校病原微生物实验室管理与安全防护.中国病原生物学杂志,2007,2(4)317-318.(2)卢艳玲，靳会娟.实验室感染及安全防护.新医学学刊，2008,5(8):1342-1343.(3)陈柳军.多种...