动物学杂志!"#$%&%’()*$+,(-.((,(/0!""#,$"(!):%&’!!香鱼肌肉与免疫器官!种同工酶的表达李明云黄福勇(宁波大学生命科学与生物工程学院宁波(%#!%%)摘要:采用聚丙烯酰胺电泳方法,对香鱼(1,%2(/,(&&)&+,3#4%,#&)肌肉和肝脏、脾脏及肾脏(种免疫器官的)种与防御机能相关的同工酶的表达进行研究,共分析了*+,、-+,、./-、.0-、/.1、2*1等)种同工酶的表达模式。结果表明,香鱼已经具有了完善的机体防御系统,肝脏和肾脏在香鱼的防御系统中发挥着十分重要的作用。本研究能为筛选具有较强抗病力和适应性的香鱼良种提供有价值的理论参考。关键词:香鱼;肌肉;免疫器官;同工酶中图分类号:*3)#4%%!;5!)文献标识码:.文章编号:"!#"6(!)((!"%#)"!6%&6"#"#$%&’($))*+,+-.*&/)+012$)*,34)56$7,8/224,$9(:7,)+-;14(!"#$%&"%’’(’)"*+,#"+’)0789:;6<=:>?.@AB=6$1?+(8):.K=(1,%2(/,(&&)&+,3#4%,#&);8=LQOH;7EE=:HCD;M:L;7LCXKEHL基金项目科技部国家科技成果重点推广项目计划(@CJ!""(2/"""%3$);第一作者介绍李明云,男,教授;主要从事鱼类遗传育种研究。收稿日期:!""$6"[6%!,修回日期:!""#6"%6!)香鱼(1,%2(/,(&&)&+,3#4%,#&)隶属鲑形目、香鱼科、香鱼属,为我国小型名贵经济鱼类。近年来,由于各地捕捞强度增大、水利设施建设以及环境污染日益严重等原因,各地香鱼资源量均急剧减少。现在,全国各地均广泛开展了香鱼的人工养殖,总产量及单位面积产量均大幅度增加。关于香鱼的地理分布、生态习性、繁殖生物学及人工繁殖技术,已经有较多报道[%’[]。当生物体处于逆境条件或受到病害侵袭时,体内的某些同工酶会发生显著的变化,所以这些酶同时又可以被用作生物体抗病力或抗逆性能的重要衡量指标。在这些酶中*+,、-+,、.0-和./-就是其中最重要的几种指示酶类;/.1可以催化>!+!分解为>!+与+!,也可催化>!+!氧化某些供氢体,连同*+,、-+,,都和动物清除自由基的能力密切相关,对动物机体的抗辐射损伤、防机体衰老和抗肿瘤等方面有极为重要的作用[&];2*1是催化酯类化合物水解的酶系,能水解多种酯类化合物,包括某些药物,因此被认为具有解毒作用。上述)种酶都与鱼体的防御性机能密切相关。从现有文献来!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!看,目前对鱼类防御性机能的研究主要集中在细胞、体液等免疫因子的成分、生理功能方面,研究鱼体内与防御机能相关的酶时,常常采用测定酶活性的方法。而在分子水平上,运用诸如同工酶等分子生物学方法对鱼体的防御机能进行定性研究的报道较少[!]。本文采用聚丙烯酰胺凝胶("#$%)电泳方法,对香鱼肌肉和免疫器官内上述&种与鱼体防御机能密切相关的酶的表达以及活性进行了研究,以了解香鱼在抗病、抗逆、抗应激机制方面的规律,为香鱼的资源保护、良种筛选提供基础资料。!材料与方法!"!材料实验用香鱼于’(()年*+!月采自浙江省宁海县凫溪镇,共,-尾,体长为,’.&+,*.*/0,体重为)(+1*2。!"#样品制备对香鱼进行活体取样,取肌肉、肝脏、脾脏、肾脏1种器官或组织,进行直接分析或置超低温冰箱(34,5)保存至分析。上述操作均在无菌条件下进行。!"$电泳、染色同工酶电泳采用聚丙烯酰胺凝胶("#$%)电泳,电极缓冲液为6789:甘氨酸,6$,;<=-.)。样品的制备及结果处理参照相建海...