锥栗直链淀粉_脂肪酸复合物的体外消化及益生元活性VIP专享VIP免费

2012年8月第27卷第8期中国粮油学报JournaloftheChineseCerealsandOilsAssociationVol．27，No．8Aug.2012锥栗直链淀粉－脂肪酸复合物的体外消化及益生元活性谢涛张儒(湖南工程学院化学化工学院，湘潭411104)摘要以菊糖与低聚果糖为对照，研究了锥栗直链淀粉与己酸、葵酸、硬脂酸复合物的抗消化作用及益生元效应。试验结果表明:锥栗直链淀粉及其脂肪酸复合物对人工胃液与小肠液都具有不同程度的抗性，其中抗消化作用最强的是分别在60℃和90℃结晶温度下制备的锥栗直链淀粉－脂肪酸复合物(CASC60和CASC90);以两歧双歧杆菌与德氏乳杆菌两株典型的益生菌为研究对象，CASC60和CASC90均表现了良好的益生元活性。因此，CASC60和CASC90具有作为新型益生元开发的潜力。关键词锥栗直链淀粉直链淀粉－脂肪酸复合物体外消化益生元活性中图分类号:TS235．2文献标识码:A文章编号:1003－0174(2012)08－0020－05基金项目:湖南省自然科学基金(11JJ6009)收稿日期:2011－08－19作者简介:谢涛，男，1970年出生，博士，副教授，硕士生导师，再生资源与食品、生物化工直链淀粉－脂类复合物的形成对直链淀粉的消化性有所影响。例如高直链玉米淀粉，由于直链淀粉凝沉消化性很差，在热条件(特别是热压处理)下加入三棕榈酸甘油酯有利于复合物的形成，抑制直链淀粉的凝沉，加快其消化速率［1］。淀粉－脂类复合物对淀粉酶稳定性的影响有两方面:一方面减小了淀粉颗粒的膨胀能力，使酶进入颗粒内部的机会降低;另一方面，淀粉－脂类复合物比直链淀粉对消化酶的抗性要高［2］。本试验在前期研究［3－6］基础上，主要研究锥栗直链淀粉－脂肪酸复合物的体外消化及益生元活性，以期为锥栗淀粉高档产品的开发提供新的科学依据。1材料与方法1．1原材料锥栗直链淀粉－脂肪酸复合物(CAFCs)的制备:以参考文献［7］分离制得的锥栗直链淀粉为原料，根据DMSO水溶法［8］在2种不同结晶温度(60、90℃)下制备己酸、葵酸和硬脂酸的直链淀粉－脂肪酸复合物。为方便计，样品均使用缩写，如:锥栗直链淀粉记作CA，在60℃下制备的锥栗直链淀粉－己酸、葵酸和硬脂酸的复合物分别记作CAHC60、CACC60和CASC60，在90℃下制备的锥栗直链淀粉－己酸、葵酸和硬脂酸的复合物分别记作CAHC90、CACC90和CASC90。人工胃液的配制［9－10］:量取9．5%～10．5%浓盐酸16．4mL，加蒸馏水至1000mL，100℃蒸汽灭菌15min，在无菌条件下，每100mL液体中加入1g胃蛋白酶(Sigma，MO，USA)，混匀后备用。人工小肠液的配制［9－10］:准确称取磷酸二氢钾6．8g，放入500mL蒸馏水，搅拌均匀，用0．4%的氢氧化钠调至pH6．8，加蒸馏水定容至1000mL，100℃蒸汽灭菌15min，冷却至50℃以下，在无菌条件下，每100mL液体中加入胰酶(Sigma，MO，USA)1g，混匀后备用。菊糖(Ⅰ)、低聚果糖(FOS)、MRS与RCM培养基:上海源聚生物科技有限公司。试验菌株:两歧双歧杆菌(Bifidobacteriumbifi-dum)、德氏乳杆菌(Lactobacillusdelbrueckii)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、大肠杆菌(Esche-richiacoli)和枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)为湖南工程学院生物工程实验室保藏。1．2测定方法体外消化试验［10－11］:称取一定量等重的FOS(对照)、锥栗直链淀粉及6种锥栗直链淀粉－脂肪酸复合物，分别放入盛有30mL人工胃液、人工小肠液的烧杯中，将烧杯置于37℃恒温培养箱体系中分别低速磁力搅拌消化6h(人工胃液中)、7h(人工小肠液中)或先4h(人工胃液中)后5h(人工小肠液中)，在培养过程中每隔一定时间取样，悬浮液全部第27卷第8期谢涛等锥栗直链淀粉－脂肪酸复合物的体外消化及益生元活性注入处理过的透析袋中，并在生理盐水中渗析24h。分别采用DNS法和酚－硫酸法测定透析袋外溶液中的还原糖与总糖含量，样品的水解率按下式计算。水解率=水解释放出的还原糖总糖含量×起始还原糖含量×100%益生元活性试验［11－13］:以等量的FOS、锥栗直链淀粉及其脂肪酸复合物分别作为2株益生菌的培养基碳源。德氏乳杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的种子液都使用MRS培养基在37℃培养24h，1mL1%的样品溶液加入到3mLMRS培养基中，然后在其中加入上述种子并在厌氧条件下37℃培养48h，直至菌...