【创新方案】高中生物专题5课题2多聚酶链式反应扩增DNA片段创新演练大冲关课堂强化新人教版选修11．PCR技术扩增DNA，需要的条件是()①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④耐热DNA聚合酶⑤mRNA⑥核糖体A．①②③④B．②③④⑤C．①③④⑤D．①②③⑥解析：PCR技术扩增DNA需要DNA模板(目的基因)、两种引物、四种脱氧核苷酸和耐热DNA聚合酶等。答案：A2．关于DNA复制，下列叙述正确的是()A．DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只有从5′端延伸DNA链B．DNA复制不需要引物C．引物与DNA母链通过碱基互补配对进行结合D．DNA的合成方向总是从子链的3′端向5′端延伸解析：DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从3′端延伸DNA链。DNA分子是反向平行的，子链是依据碱基互补配对原则，在DNA聚合酶作用下合成的，其合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸。答案：C3．对PCR的实验操作顺序的叙述，正确的是()A→→→→．准备移液混合离心反应B→→→→．准备移液离心混合反应C→→→．离心移液混合反应D→→→．移液离心混合反应解析：PCR的实验操作中，首先是准备，即按照PCR反应体系的配方将需要的试剂摆放在实验桌上，其次是移液，即用微量移液器按照配方在微量离心管中依次加入各组分；然后是混合，即盖严离心管口的盖子，用手指轻轻弹击管壁，使反应液混合均匀；接着是离心，即将微量离心管放在离心机上，离心约10s，最后是反应。答案：A4．如下图所示的DNA是哪次循环的产物A．第一次循环B．第二次循环C．第三次循环D．第四次循环解析：在PCR反应中，从第二次循环开始，上次产生的DNA分子又可作为模板参与反应，所以会形成DNA分子两端均含引物的情况，如下图所示：因此题干中所示情况是第一次循环的产物。答案：A5．PCR仪实质上是一台自动调控温度的仪器，它调控不同温度的目的是()①95℃，使DNA分子变性，失去生物活性②95℃，使DNA分子变性，解开螺旋③55℃，使DNA分子开始复制、延伸④55℃，使DNA分子的两条单链与引物结合，恢复活性⑤72℃，使DNA分子开始复制、延伸⑥72℃，使DNA分子恢复双螺旋结构，恢复活性A．①③⑤B．②③⑤C．②④⑤D．②④⑥解析：PCR技术在温度上升到90℃以上时，双链DNA解聚为单链；当系统温度下降到50℃左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合；当系统温度上升到72℃左右时，溶液中的四种脱氧核苷酸(A、G、C、T)在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。答案：C6．PCR技术是把一个DNA片段在体外酶的作用下，合成许许多多相同片段的一种方法，利用它能快速而特异地扩增任何要求的目的基因或DNA分子片段，它的基本过程如下图所示：注：图中短线表示每次扩增过程中需要的引物。每个引物约含20个核苷酸，并分别与两条单链DNA结合，其作用是引导合成DNA子链。(1)PCR技术的原理是模拟生物体内___________________________________________的过程。(2)PCR扩增过程中需要对DNA片段进行高温处理，其目的是____________________。此过程在生物体内称为____________，需________酶的参与。(3)假如引物都用3H标记，从理论上计算，所得DNA分子中含有3H标记的占________________________________________________________________________。解析：(1)PCR的原理是模拟生物体内的DNA复制过程。(2)PCR扩增过程中，通过高温处理使DNA分子的两条链之间的氢键断开成为单链，该过程在生物体内称为解旋，需要解旋酶参与。(3)若引物用3H标记，不论循环多少次，所合成的DNA分子都具有放射性，即占100%。答案：(1)DNA复制(2)使DNA的两条链彼此分开解旋解旋(3)100%
