选修1课时4微生物的实验室培养班级:__________姓名:__________设计人__________日期__________课前预习·预习案学习目标11．了解有关培养基的基础知识。2．进行无菌技术的操作。3．进行微生物的培养。4．实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌;常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法。方法条件作用对象消毒煮沸消毒法100°C，煮沸5〜6min杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢巴氏消毒法70〜75℃煮30min或80℃煮15min不耐高温的液体化学药剂法体积分数为70%的酒精对双手消毒质量分数为50%的石炭酸、来苏水对空气消毒一定浓度的乳酸、食醋通过熏蒸对空气进行消毒紫外线法紫外线照射30min物体表面或空气中的微生物灭菌灼烧灭菌在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧对接种环、接种针或其他金属工具灭菌，也可以对试管口、瓶口灭菌干热灭在干热灭菌箱内，耐高温且需保持干菌160〜170"条件下，加热1〜2h燥的物品，如玻璃器皿和金属用具等高压蒸汽灭菌在高压蒸汽灭菌锅内，121℃,100kPa，灭菌15〜30min主要是耐高温物品，如金属器械、玻璃、塘瓷、橡胶及一些药物等紫外线30W照射30min小型接种室、接种箱等自主梳理11．培养基(1)概念：人们按照微生物对________的不同需求，配制出供其________的营养基质。(2)培养基的种类(3)成分：a.主要成分：水、________、氮源、________。b.其他成分：还需要满足微生物对________、特殊营养物质以及________的要求。c.请连线表示牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成：①牛肉膏a.碳源、氮源和维生素②蛋白胨b.碳源、氮源、磷酸盐和维生素③NaClc.氢元素和氧元素④H2Od.无机盐d.请连线完成其他培养基的特殊要求：①培养乳酸杆菌a.将pH调至酸性②培养霉菌b.pH调至中性或微碱性③培养细菌c.培养基中添加维生素④培养厌氧微生物d.需提供无氧条件2．无菌技术(1)目的：获得________培养物。(2)关键：防止________的入侵。(3)两种无菌技术的比较：比较项目消毒灭菌作用强度________的理化因素________的理化因素作用程度杀死物体表面或内部的________微生物杀死物体表面或内部的______微生物芽孢和孢子一般不能杀灭能杀灭适用对象操作空间、活体生物材料、操作者衣着和双手操作工具、玻璃器皿、培养基等常用方法___________消毒法、___________消毒法、___________消毒法、___________消毒法________法、________灭菌法、________灭菌法(4)连线选择如下材料或用具所需的无菌技术：①吸管、培养皿、试管.烧瓶a.灼烧灭菌②培养细菌用的培养基b.消毒③接种环、接种针c.干热灭菌④实验操作者的双手d.高压蒸汽杀菌3．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基计算：根据培养基________的比例，计算培养基中各成分的用量↓称量：牛肉膏比较________，可放在________上称取。易吸潮，称取时动作要迅速，称后要及时盖上瓶盖↓溶化：牛肉膏和称量纸+水取出称量纸加蛋白胨和氯化钠加________(注意：要不断用玻棒搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂)补加蒸馏水至100mL↓灭菌：对培养基进行________灭菌↓倒平板：待培养基冷却至50°C左右时，在________附近倒平板4．平板划线法纯化大肠杆菌：(1)原理：通过________在琼脂固体培养基表面连续________的操作，将聚集的菌种逐步稀释________到培养基的表面。(2)操作步骤：5．稀释涂布平板法纯化大肠杆菌：(1)原理：将菌液进行一系列的________，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。(2)步骤：A.系列稀释操作步骤：B.涂布平板操作步骤：涂布器消毒：将涂布器浸在盛有________的烧杯中消毒↓取菌液：取少量菌液(不超过0.1mL)，滴加到________表面↓涂布器灭菌：将沾有少量酒精的涂布器____，待酒精燃尽后，冷却8〜10s↓涂布平板：用涂布器将菌液均匀地________在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使菌液分布均匀6．菌种保藏比较项目临时保藏甘油管藏适用范围_______的菌种________的菌种培养基_______培养基________培养基保藏温度4°C-20°C具体方法接种到固体斜面培养基上→适宜温度下培养→4°C冰箱中保藏甘油瓶中装入甘油后灭菌→将菌液转移至甘油瓶中→混匀后冷冻箱中...
