第4课时实验:生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定知识精华一、可溶性还原糖的鉴定原理:生物组织中普遍存在的可溶性糖种类较多,常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。前三种糖的分子内都含有游离的具有还原性的半缩醛基,因此叫还原性糖;蔗糖的分子内没有游离的半缩醛基,因此叫非还原性糖,不具有还原性。实际上本实验中,用斐林试剂只能检验生物组织中可溶性的还原糖存在与否,而不能鉴定可溶性的非还原性糖。可溶性还原糖与斐林试剂(质量浓度为0.1g/ml的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/ml的硫酸铜溶液配制而成)混合后,可以生成砖红色沉淀。用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时,溶液的颜色变化过程为:浅蓝色棕色砖红色二、脂肪的鉴定原理:鉴定生物组织中是否含有脂肪时,可用苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ,苏丹Ⅲ染液遇脂肪的染色反应为橘黄色,苏丹Ⅳ染液遇脂肪的染色反应为红色。三、蛋白质的鉴定原理:鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂。双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1g/ml的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.01g/ml的硫酸铜溶液。在碱性溶液NaOH中,双缩脲(H2NOC-NH-CONH2)能与Cu2+作用,形成紫色或紫色的络合物,这个反应叫双缩脲反应。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此,蛋白质都可与双缩脲试剂发生颜色反应,从而用来鉴定蛋白质的存在。题例领悟例1:用斐林试剂鉴定可溶还原糖时,溶液的颜色变化过程为:A、浅蓝色棕色砖红色B、无色浅蓝色棕色C、砖红色浅蓝色棕色D、棕色绿色无色解析:斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后,立即生成浅蓝色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2与加入的葡萄糖在加热的条件下,能够生成砖红色的Cu2O沉淀。因此,答案为A例2:将面团包在纱布中在清水中搓洗,鉴定黏留在纱布上的黏稠物质和洗出的白浆用的试剂分别是:A、碘液、苏丹Ⅲ溶液B、双缩脲试剂、碘液C、双缩脲试剂、苏丹Ⅳ染液D、碘液、斐林试剂解析:白浆为淀粉,淀粉遇碘变蓝,黏稠物质为蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应。因此,答案为B自我评价一、选择题:1、徒手切片时的刀口方向应是()A、向前B、向内C、向左D、向右2、在鉴定蛋白质样品时,加双缩脲试剂的正确操作方法是()A、先加A液,混合后再加B液B、先加B液,混合后再加A液C、A、B液混合后立即加入D、上述方法都可以采用3、在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中,对实验材料的选择叙述中,错误的是()A、甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根等,都含有较多的糖且近于白色,因此可以用于进行可溶性还原糖的鉴定B、花生种子含脂肪多且肥厚,是用于脂肪鉴定的理想材料C、大豆种子蛋白质含量高,是进行蛋白质鉴定的理想的植物组织材料D、鸡蛋清蛋白质多,是进行蛋白质鉴定的动物材料4、下列关于实验一操作步骤的叙述中,正确的是()A、用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液,可直接用于蛋白质的鉴定B、脂肪的鉴定实验中需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴C、鉴定可溶性还原糖时,要加入斐林试剂甲液摇匀后,再加入乙液D、用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后,再加入含样品的试管中,且必须现混现用5、某学生在显微镜下观察落花生子叶的切片,当转动细准焦螺旋时,有一部分细胞较清晰,另一部分较模糊,这是由于()A、反光镜末调好B、标本切得厚薄不均C、细准焦螺旋末调好D、显微镜物镜损坏6、在可溶性还原糖及蛋白质鉴定时,事先留出一些组织样液的目的是()A、与反应后混合液的颜色做对比B、失败后再重做一次C、下次实验再用D、组织样液过多颜色反应不明显二、非选择题在用花生种子做脂肪鉴定实验时,基本步骤是:取一粒浸泡过h的花生种子,去掉种皮;取花生的,进行徒手切片;选取材料放在载玻片中央;用滴管在材料上滴2~3滴染液,染色1min;用吸水纸吸去多余的染液,在材料上滴1~2滴体积分数为溶液,洗去浮色;再用吸水纸吸去多余的洗液,在材料上滴1~2滴蒸馏水,盖上盖玻片,制成临时装片;在低倍显微镜下观察,会发现材料细胞中存在大量被染成色的圆形小颗粒。说明材料中存在。要想进一步看清楚视野右上方的细胞时,应将装片向移动,使细胞...