实验室环境和人体表面的微生物检查一.实验目的:1
证明实验室环境与体表存在的微生物2
观察不同类型的微生物的形态特征3
比较不同场所不同条件下的细菌的数量和类型二.实验器材:培养基:肉膏蛋白胨琼脂平板
溶液和试剂:无菌水
仪器和其他用品:灭菌棉签(装在试管内),试管架,煤气灯或酒精灯,记号笔和废物缸等
三.实验原理:平板培养基含有细菌生长所需要的营养成分,当取自不同来源的样品接种于培养基上,在适宜温度下培养1-2d内每一菌体即能通过很多次细胞分裂而进行繁殖,形成一个可见的细胞群体集落,称为菌落
每一种细菌所形成的菌落都有它自己的特点,例如菌落的大小,表面干燥或湿润、隆起或扁平、粗糙或光滑,边缘整齐或不整齐,菌落透明或半透明或不透明,颜色以及质地疏松或紧密等
因此,可通过平板培养来检查环境中细菌的数量和类
四.实验步骤:1
培养基的制作(1)称量制作二十个肉高蛋白琼脂平板牛肉膏1
65g蛋白胨5
5gNacl2
75g琼脂10g水550mlpH7
2121℃灭菌20min(2)熔化按上述顺序将材料分别放到一大烧杯中混合加热至其熔化
(3)调节PH值待琼脂熔化后,调节溶液PH至7
(4)转移灭菌将溶液从烧杯中转移至锥形瓶中,塞上棉塞加牛皮纸包裹后同洗净的培养基和放有棉塞的试管一同放入高压灭菌锅里,灭菌20min左右
(5)接种最后,将锥形瓶中溶液在酒精灯火焰旁转移至灭菌后的培养皿中,等待其冷却固定后便可接种
2.微生物的获取和接种(1)分梯度制作空气培养基取三个无菌培养基分别标号3-3-空气-5ˊ-1-37°,3-3-空气-5ˊ-2-37°,3-3-空气-5ˊ-3-28°同时开盖放置五分钟后盖上盖子,另取三个无菌培养基分别标号3-3-空气-10ˊ-1-37°,3-3-空气-10ˊ-2-37°,3-3-空气-10ˊ-3-28°(2)对比接种手上的微生物取一无菌