037细胞工程(一)(一)植物细胞工程1
理论基础(原理):细胞全能性全能性表达的难易程度:受精卵>生殖细胞>干细胞>体细胞;植物细胞>动物细胞2
植物组织培养技术(1)过程:离体的植物器官、组织或细胞―→愈伤组织―→试管苗―→植物体(2)用途:微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产
(3)地位:是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序
植物体细胞杂交技术(1)过程:(2)诱导融合的方法:物理法包括离心、振动、电刺激等
化学法一般是用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂
(3)意义:克服了远缘杂交不亲和的障碍
(二)动物细胞工程1
动物细胞培养(1)概念:动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和繁殖
(2)动物细胞培养的流程:取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织)→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养
(3)细胞贴壁和接触抑制:悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁
细胞数目不断增多,当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制
(4)动物细胞培养需要满足以下条件①无菌、无毒的环境:培养液应进行无菌处理
通常还要在培养液中添加一定量的抗生素,以防培养过程中的污染
此外,应定期更换培养液,防止代谢产物积累对细胞自身造成危害
②营养:合成培养基成分:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等
通常需加入血清、血浆等天然成分
用心爱心专心1③温度:适宜温度:哺乳动物多是36
5℃;pH:7
④气体环境:95%空气+5%CO2
O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培养