江苏省淮安中学高三生物总复习 -01实验物质提取鉴定类学案VIP免费

第一部分：物质的提取和鉴定类一．实验1．检测生物组织中的还原性糖、脂肪和蛋白质（B级）2．叶绿体色素的提取和分离（B级）3．蛋白质的提取和分离（A级）4．DNA的粗提取与鉴定（B级）5．模拟尿糖的检测（B级）二．知识讲解1．检测生物组织中的淀粉、还原性糖、脂肪、蛋白质、DNA（B级）实验材料试剂或染液颜色条件注意点①淀粉绿色叶片---脱色处理（酒精）②还原性糖梨、苹果沸水浴斐林试剂使用方法③脂肪花生子叶---显微镜、载玻片、盖玻片④蛋白质豆浆、鸡蛋清---双缩脲试剂使用方法⑤DNA鸡血细胞、菜花沸水浴设置对照实验【思考】⑴选材要求是。可溶性还原性鉴定中可否选择甜菜、甘蔗做材料？；进行DNA鉴定时，能否选用哺乳动物红细胞做材料？。⑵上述5个实验需要水浴加热的是；需要用到酒精的是；需要显微镜的是。⑶物质鉴定实验如何设置对照组？。[碘液蓝色斐林试剂砖红色苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液橘黄色或红色双缩脲试剂紫色二苯胺蓝色⑴××含量丰富，色浅否否⑵②⑤①③⑤③⑶对照组加入已知的待测物质，采用比色法鉴定]2．叶绿体色素的提取和分离（B级）、蛋白质的提取和分离（A级）、DNA的粗提取与鉴定（B级）叶绿体色素的提取和分离蛋白质的提取和分离DNA的粗提取与鉴定实验材料新鲜的菠菜叶片哺乳动物成熟的红细胞鸡血细胞或菜花实验步骤研磨（CaCO3/SiO2/乙醇）↓过滤（滤液）↓画滤液细线（具体操样品处理（洗涤/释放/分离）↓粗分离（透析）↓纯化（凝胶色谱法）↓破碎细胞，取含DNA滤液↓去除滤液中的杂质↓DNA的析出（纯化）用心爱心专心1作）↓纸层析（四条色素带）纯度鉴定（SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳）↓DNA的鉴定思考⑴叶绿素a、叶绿素b两条色素带颜色浅的原因？⑵红细胞洗涤、加蒸馏水和甲苯、透析、凝胶色谱法纯化的目的？⑶两次使用蒸馏水的作用？[⑴用发黄的叶片为实验材料未加碳酸钙研磨不充分加入过量无水乙醇⑵去除附着在细胞表面的杂质使细胞破裂，释放出血红蛋白去除小分子杂质提高血红蛋白的纯度⑶第一次使细胞破裂，释放出DNA第二次稀释NaCl溶液，析出DNA]3．模拟尿糖的检测（B级）⑴实验原理：葡萄糖试纸是一种酶试纸，由葡萄糖氧化酶、过氧化氢酶和某种无色的化合物固定于滤纸上制成。当尿液滴加到酶试纸上时，尿液中的葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化作用下生成葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化氢酶的催化作用下形成水和原子氧，原子氧可以将试纸上无色的化合物氧化成有色化合物，使试纸呈现特定的颜色，再与标准比色卡比对，即可知道尿样中葡萄糖的含量。⑵方法步骤：①将5个分别装有水、葡萄糖溶液、三份模拟“尿样”的滴瓶和5张葡萄糖试纸分别对应做好标记，并在记录本上设计好记录表格；②分别用滴管从5个滴瓶中吸取溶液，在对应的葡萄糖试纸上各滴加2滴。③观察试纸的颜色变化，与标准比色卡对比，判断出“尿糖”的含量。待测样品水葡萄糖溶液模拟“尿样”1模拟“尿样”2模拟“尿样”3颜色变化【思考】⑴本实验中，水和葡萄糖溶液的作用是什么？⑵设计一个实验证明糖尿病人尿液中含有葡萄糖。[⑴对照作用⑵①取样：取正常人的尿液和糖尿病患者的尿液②检测：斐林试剂（注意水浴加热）或班氏试剂或尿糖试纸③观察：（用斐林试剂检测）试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液，未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液④结果分析：因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖，与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀，而正常人尿液中无还原糖，所以没有发生反应]用心爱心专心2