索氏抽提法实验报告一、实验目的了解索氏抽提法测定粗脂肪含量的原理;掌握索氏抽提法测定粗脂肪含量操作方法;测定脂肪的含量,可以作为鉴别样品品质优劣的一个指标。二、实验原理脂肪含量的测定有很多方法,如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、电测和核磁共振法等。目前国内外普遍采用抽提法,其中索氏抽提法()是公认的经典方法,也是我国粮油分折首选的标准方法。本实验采用索氏抽提法中的残余法,即用低沸点有机溶剂(乙醚或石油醚)回流抽提,除去样品中的粗脂肪,以样品与残渣重量之差,计算粗脂肪含量。由于有机溶剂的抽提物中除脂肪外,还或多或少含有游离脂肪酸、甾醇、磷脂、蜡及色素等类脂物质,因而抽提法测定的结果只能是粗脂肪。三、实验试剂和器材实验材料油料作物种子花生、中速滤纸仪器①脂肪仪②干燥器直径〜,盛变色硅胶③不锈钢镊子(长)④培养皿⑤分析天平⑥称量瓶⑦恒温水浴⑧烘箱⑨样品筛(目)试剂无水乙醚或低沸点石油醚()四、操作步骤准备①将滤纸切成X,叠成一边不封口的纸包,用硬铅笔编写顺序号,按顺序排列在培养皿中。将盛有滤纸包的培养皿移入土°C烘箱中干燥,取出放入干燥器中,冷却至室温;②按顺序将各滤纸包称重(记作)、称量时室内相对湿度必须低于%。包装和干燥①将花生研碎放入土C的烘箱中干燥,移至干燥器中冷却至室温;②称取约左右研碎的样品放入上述已称重的滤纸包中装入,封好包口,按顺序号依次放入称量瓶中称重(记作)。抽提①将装有样品的滤纸包用长镊子放入抽提筒中,向其中注入一次虹吸量的倍的无水乙醚,使样品包完全浸没在乙醚中;②连接好抽提器各部分,接通冷凝水水流,在恒温水浴中进行抽提,调节水温为°C,使冷凝下滴的乙醚成连珠状(虹吸一次),抽提至抽取筒内的乙醚用滤纸点滴检查无油迹为止(约需〜本次实验);③抽提完毕后,用长镊子取出滤纸包,在通风处使乙醚挥发(抽提室温以〜°C为宜)。提取瓶中的乙醚另行回收。称重①待乙醚挥发之后,将滤纸包置于°C烘箱中干燥,放入干燥器冷却至恒重为止(记作)。五、实验结果粗脂肪含量(%)=b-Cx100b-a式中::称量瓶加滤纸包重():称量瓶加滤纸包和烘干样重():称量瓶加滤纸包和抽提后烘干残渣重()由实验得数据::称量瓶加滤纸包重():称量瓶加滤纸包和烘干样重():称量瓶加滤纸包和抽提后烘干残渣重()粗脂肪含量(%)=b-CxlOOb-a°-84"0-48x1000.84-0.23=59.02%即本次试验得粗脂肪含量为:%六、注意事项测定用样品、抽提器、抽提用有机溶剂都需要进行脱水处理。这是因为:第一,抽提体系中有水,会使样品中的水溶性物质溶出,导致测定结果偏高;第二,抽提体系中有水,则抽提溶剂易被水饱和(尤其是乙醚,可饱和约%的水),从而影响抽提效率;第三,样品中有水,抽提溶剂不易渗入细胞组织内部,结果不易将脂肪抽提干净;试样粗细度要适宜。试样粉末过粗,脂肪不易抽提干净;试样粉末过细,则有可能透过滤纸孔隙随回流溶剂流失,影响测定结果;索氏抽提法测定脂肪最大的不足是耗时过长,如能将样品先回流〜次然后浸泡在溶剂中过夜,次日再继续抽提,则可明显缩短抽提时间;II型油分测定器容量大,适合于样品较多的选种鉴定工作使用,温度控制在°C左右,可提取完毕;必须十分注意乙醚的安全使用。抽提室内严禁有明火存在或用明火加热。乙醚中不得含有过氧化物,保持抽提室内良好通风,以防燃爆;乙醚中过氧化物的检查方法是:取适量乙醚,加入碘化钾溶液,用力摇动,放置,若出现黄色则表明存在过氧化物,应进行处理后方可使用。处理的方法是:将乙醚放入分液漏斗,先以乙醚量的稀溶液洗涤〜次,以除去乙醇;然后用盐酸酸化,加入乙醚量的或溶液,振摇,静置,分层后弃去下层水溶液,以除去过氧化物;最后用水洗至中性,用无水或无水脱水,并进行重蒸馏。七、思考与讨论如何利用残余法测定油料作物种子中的粗脂肪含量?答:残余法测定油料作物种子中的粗脂肪含量,是用低沸点有机溶剂(乙醚或石油醚)回流抽提,除去样品中的粗脂肪,以样品与残渣重量之差,来计算粗脂肪含量。测定过程中为什么需要对样品、抽提器、抽提用有机溶剂都要进行脱水处理...