低温胁迫对甘蓝叶片抗寒性的影响VIP免费

低温胁迫对甘蓝叶片抗寒性的影响（东北农业大学园艺园林学院，哈尔滨，150030）摘要：以甘蓝为实验材料，在-20℃低温处理条件下研究冬季自然低温以及寒害对甘蓝叶片过氧化物酶的活性以及外渗电导率大小的影响。实验采用愈创木酚法、电导率仪法，对其进行测定。结果表明：在低温处理后，叶片较常温处理的叶片过氧化物酶活性降低、外渗电导率显著增高。关键词：低温；甘蓝；寒害；抗寒性前言甘蓝(BrassicaoleraceaL.)是我国一种重要的芸薹属蔬菜，为半耐寒蔬菜，适宜在15～25℃的气温条件下生长，种植面积在叶菜类中居第二位。甘蓝不易感病、对环境的适应能力较强、易于储藏和运输、并具有品质好产量高等特点，大面积栽培于中国各地，在中国东北、西北、华北等地区属于主栽蔬菜品种，几乎可以全年供应上市。在露地越冬栽培条件下，要求品种可耐零下5℃左右的低温。鉴于其特殊性及重要性，有必要研究甘蓝的抗寒性。前人关于低温胁迫对甘蓝的影响做过很多研究，早在1995年赵青岩[1]等人就利用电导法测定早熟甘蓝幼苗叶片的电导率来判断其抗冻性，试验得出“四叶龄苗成龄苗子苗”的抗冻性强弱顺序；长到四片叶子时期的甘蓝幼苗在遭受冷冻后会另其致死。吴能表[2]等研究低温条件下对甘蓝处理观察在这期间其各项生理生化指标的变化趋势，结果表明在0-30min内，甘蓝幼苗叶片中脯氨酸含量从一开始就呈上升趋势并逐渐升高，与其变化趋势一致的还有：总糖、可溶性糖含量、丙二醛含量；在这过程中变化趋势为不断下降的为：脂肪酸、蛋白质含量；体内酶活性呈先上升后下降的趋势，如：POD、SOD。本研究利用甘蓝材料，测定在零下20℃低温胁迫条件下其叶片中过氧化物酶活性及叶片外渗电导率大小以期阐明低温胁迫对过氧化物酶及细胞膜透性的影响，为露地越冬甘蓝的低温承受程度及抗寒材料的选育提供科学依据。1材料与方法1.1实验材料甘蓝(BrassicaoleraceaL.)叶片：市售1.2实验方法将甘蓝叶片置于-20℃冰箱中冷冻处理15分钟作为处理，另一份甘蓝叶片置于室温作对照。1.3生理指标的测定方法1.3.1过氧化物酶活性测定：愈创木酚法以张龙翔[3]等方法为参照，稍作修改。将处理好的甘蓝叶片切碎，放入研钵中，加适量的磷酸缓冲液研磨成匀浆。将匀浆液全部转入离心管中，于4000r/min离心10min，上清液转入25mL容量瓶中。沉淀用5mL磷酸缓冲液再提取两次，上清液并入容量瓶中，定容至刻度，低温下保存备用。配置酶活性测定的反应体系：依次加入2.9mL0.05mol·L-1磷酸缓冲液；1.0mL2％H2O2；1.0mL0.05mol·L-1愈创木酚和0.1mL酶液。用加热煮沸5min的酶液为对照，反应体系加入酶液后，立即于37℃水浴中保温15min，然后在470nm波长下比色，测定吸光值。1.3.2外渗电导率测定：电导仪法[4]将两份处理好的叶片分别放入两个针筒中并各加20ml蒸馏水，用注射器抽气至叶片下沉入水下，浸泡10分钟后测电导率（S1），用微波炉煮沸后测电导率（S2）。2结果与分析表1低温胁迫下甘蓝各生理指标的测定结果品种温度（℃）过氧化物酶活性（μg·g-1·min-1）相对电导率（L）伤害率（％）甘蓝-20℃室温406.67727.330.930.1591.76%2.1低温胁迫对过氧化物酶活性的影响过氧化物酶是植物体内重要的呼吸酶类，具有消除过氧化氢和酚类、胺类毒性的双重作用[5]。过氧化物酶能够清除植物体内产生的活性氧，减少活性氧对植物的伤害。因此通过测定过氧化物酶的活性可判断植物的抗逆性。当植物处于低温胁迫时，过氧化物酶活性降低[6]。过氧化物酶活性越低，植物受伤害越大。由表1可知，甘蓝在低温处理后过氧化物酶活性出现降低，且降低幅度较大。说明低温下，甘蓝叶片内的过氧化物酶活性受到影响，甘蓝叶片受伤害较大。2.2低温胁迫对甘蓝叶片细胞膜透性的影响植物对温度胁迫的适应主要在于细胞膜。植物体内细胞的膜系统以及细胞器膜体系与植物抗寒性有十分密切的关系[7]。当植物受到冻害时，其生物膜发生相变，膜结构也随之发生改变。进而引起膜结构破坏，透性增加，电解质大量外渗，使细胞受损。简令成等[8]研究表明，低温引起的细胞膜结构破坏是导致植物寒害损伤和死亡的根本原因。膜的流动性越小，植物的抗寒性越弱，膜的流动性越大，植物...