微柱凝胶免疫检测技术反应原理微柱凝胶免疫反应的本质是红细胞凝集试验，也可称之微柱凝胶血凝试验（MicrocolumnGelHeamagglutinationAssay，MGHA）。在微柱凝胶管中，红细胞和相应抗体结合后，形成红细胞凝集团块。在一定离心力下，该凝集团块位于胶表面或胶中；而红细胞未和相应抗体结合，仍为分散的红细胞，在同样的离心力下，红细胞沉降到微柱管尖底部。www.bioxun.com4+2+-www.bioxun.com特点和优点简单：不需洗涤，对阴性结果不需确证试验，适用于大量标本检测，解决了Coombs试验因为程序复杂费时等原因未能在临床常规应用问题。使不完全抗体检测理论“金标准”成为临床的“金标准”。多份标本一次离心出结果，有利于临床大量标本检测。另外还具备准确、敏感、标本用量少、结果保存时间长、易于标准化、操作更安全等优点。产品操作一.准备工作检测卡的准备1.在18-25℃条件下平衡30分钟。2.离心2-3分钟，均衡反应介质。3.外观检查应无气泡、干胶和杂质。4.要缓慢撕膜。防止膜面上的液滴凝结（因冷热交替产生的）污染邻孔。离心！www.bioxun.com检测标本的准备1.标本要求用EDTA抗凝管采集的新鲜血（如陈旧血需设阴性对照）。2.抗凝血样标本要上清澄清。如有纤毛状、浑浊、乳糜、溶血、脂肪等状，应再次洗涤离心。为防止纤维蛋白影响红细胞沉降，建议使用红细胞稀释液。3.血辫血样须放置试管中离心处理，确保血清澄清微黄。必要时需洗涤。4.在18-25℃条件下平衡30分钟，防止冷凝集。红细胞悬液的制备1.将红细胞配制为0.8%的悬液，最高浓度不要超过1%。如:取8μl压积红细胞，加入到1ml的红细胞稀释液（抗人球蛋白试验要求用低离子液配置红细胞悬液）中，配制出的红细胞悬液浓度大约为0.8%。2.外观检查呈均匀淡红色，无血块、无絮状物（如有纤维蛋白需去除）。www.bioxun.com二.结果判定阳性结果：红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原抗体复合物浮在凝胶表面或胶中，为阳性反应。阴性结果：红细胞抗原无相应的抗体结合，不出现特异性抗原抗体复合物，红细胞沉于微柱凝胶的尖底部，为阴性反应。反应强度：特异性红细胞抗原抗体复合物位于胶表面，为强阳性反应；复合物在胶中，为弱阳性反应；愈靠近胶底部颗粒愈小，反应愈弱。？www.bioxun.com4+红细胞复合物（凝集）位于凝胶表面3+大部分红细胞复合物位于凝胶表面，少部分位于凝胶中部2+大部分红细胞复合物位于凝胶中部，少部分位于凝胶中上部1+红细胞复合物位于凝胶中下部±与同一卡中阴性管结果对照，如与阴性结果有差别，即为±-红细胞完全沉积在凝胶管尖底部完全溶血凝胶和液体无凝集或未凝集的红细胞，液体出现透明清澈红色不完全溶血残留红细胞在胶表面、胶中或胶底部，液体出现透明清澈红色混合凝集红细胞复合物位于凝胶表面和凝胶底部４＋３＋２＋＋±－ＨＨＭ完全不完全混合凝集现象及说明反应强度www.bioxun.com三、标准操作规程www.bioxun.com1、ABO、RhD血型定型检测卡（单克隆抗体）操作步骤：1）将准备好的检测卡做好标记；2）将待检者血浆分别加入5-6管中，各50µl；www.bioxun.com50µl50µl待检者血浆3）将待检者0.8%红细胞悬液分别加入1-4管中，各50lµ；www.bioxun.com待检者0.8%红细胞悬液50µl50µl50µl50µl4）取0.8%的ABO血型反定型红细胞试剂，分别加入5-6管中，各50lµ；50µl50µlA细胞B细胞5）离心5分钟（900rpm2分钟，1500rpm3分钟）；6）结果判读。结果：A型RhD阳性www.bioxun.com50µl50µl50µl2、ABO、RhD血型检测卡（微柱凝胶）操作步骤：1）将准备好的检测卡做好标记；2）将待检者0.8%红细胞悬液分别加入第1—3或4—6管中，各50lµ；待检者的0.8%红细胞悬液www.bioxun.com3）离心5分钟（900rpm2分钟，1500rpm3分钟）；4）结果判读。结果：1.A型RhD阳性；2.B型RhD阳性www.bioxun.com3、Rh血型抗原检测卡（单克隆抗体）操作步骤:1）将准备好的检测卡做好标记；2）将待检者0.8%红细胞悬液分别加入1—6管中，各50µl；待检者0.8%红细胞悬液50µl50µl50µl50µl50µl50µlwww.bioxun.com3）离心5分钟（900rpm2分钟，1500rpm3分钟）；4）结果判读。结果：RhD、C、e阳性www.bioxun.com...
