山东大学实验报告3月14日姓名系年级17级学号同组者科目细胞实验实验题目观察细胞的通透性仪器编号一、实验目的1.理解溶血现象及细胞通透性的普通规律；2.观察细胞膜的渗入性及各类物质进入细胞的速度；二、实验原理细胞膜是一种半透膜,对物质的通透含有选择性，使细胞含有一种相对稳定的内环境。将红细胞放在低渗溶液中，水分子会大量渗到细胞内，使细胞胀破,血红蛋白释放到介质中，发生溶血。将红细胞放入含有不同溶质的溶液中，由于细胞膜对多个溶质的透性不同，有的溶质能够渗入，有的则不能，渗入的溶质能提高红细胞的渗入压，因此促使水分进入细胞。由不透明的红细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液，这种现象称为溶血(hemolysis)。随着水分不停进入，红细胞最后破裂并引发溶血。因而发生溶血现象所需的时间长短能够作为测量物质进入红细胞速度的一种指标。因此，本实验选用红细胞作为细胞膜透性的实验材料，将其放人不同的介质溶液中，观察红细胞的变化。三、实验用品1.实验材料鸡血（事先取好，加入Alsever液，混匀后制悬液，4℃保存）；2.实验试剂0.85%的氯化钠溶液（等渗溶液）；0.0085%的氯化钠溶液（低渗溶液）0.8mol/L的甲醇、0.8mol/L的丙三醇、6%的葡萄糖溶液、2%的TritonX-100溶液（高渗溶液）；3.实验器材试管（此处用的是刻度离心管）六支、离心机、滴管、载玻片、盖玻片、显微镜等四、实验环节1.取血吸取预先解决好的鸡血溶液6mL，加入4mL的等渗0.85%的氯化钠溶液，混匀后放入离心机，1200rpm离心5min；山东大学实验报告3月14日姓名系年级17级学号同组者科目细胞实验实验题目观察细胞的通透性仪器编号2.制细胞悬液用滴管吸取上清液，加入与沉淀量相等的等渗NaCl溶液，混匀制成悬液。（如果沉淀量少于1.2ml，则补充鸡血）3.溶血现象观察在离心管之中分别加入0.85%的氯化钠溶液、0.0085%的氯化钠溶液、0.8mol/L的甲醇、0.8mol/L的丙三醇、6%的葡萄糖溶液、2%的TritonX-100溶液3mL，滴入两滴细胞悬液，立刻混匀并计时，溶血现象发生后，统计溶血时间，并制片观察溶血状况：0.0085%的氯化钠溶液、0.8mol/L的甲醇、2%的TritonX-100溶液（高渗溶液）反映非常快速，因此需立刻观察；0.8mol/L的丙三醇、6%的葡萄糖溶液反映程度不激烈，因此，每间隔10分钟观察统计溶血状况，观察1h。注意：6%的葡萄糖溶液有强烈的诱导细胞融合的作用，因此，必须严格混匀之后进行观察。五、实验成果判断(一)判断指标(1)不溶血:液体分二层，上层浅黄色透明，下层红色不透明。镜检红细胞完好。(2)不完全溶血:溶液混浊，上层变成红色，镜检有部分红细胞有缺口或破裂。(3)完全溶血:液体变红并且透明，镜检发现细胞全部成碎片。(二)统计溶血时间:试剂类型与否溶血时间成果分析0.85%NaCl+稀释鸡血否等渗溶液中不会发生破裂，作为对照。0.0085%NaCl+稀释鸡血是30s低渗溶液，细胞吸水涨破。0.8mol/L甲醇+稀释鸡血是8s高渗溶液，细胞通透性大，造成胞内渗入压升高，吸水涨破。0.8mol/L丙三醇+稀释鸡血是9s高渗溶液，细胞通透性大，造成胞内渗入压升高，吸水涨破。山东大学实验报告3月14日姓名系年级17级学号同组者科目细胞实验实验题目观察细胞的通透性仪器编号6%葡萄糖溶液+稀释鸡血是1h内未完全溶血高渗溶液，细胞吸取缓慢，细胞逐步吸水涨破。2%TritonX-100溶液+稀释鸡血是1h内未完全溶血高渗溶液，细胞吸取缓慢，细胞逐步吸水涨破。六、实验成果照片1.0.85%NaCl溶液（对照组）2.0.0085%NaCl溶液图10.85%NaCl溶液下的细胞形态（放大倍数10×40）：细胞轮廓明显清晰，细胞大小正常，细胞质透光正常。图3加0.0085%NaCl溶液后的细胞形图2加入后30s，细胞悬液出现溶血现象：山东大学实验报告3月14日姓名系年级17级学号同组者科目细胞实验实验题目观察细胞的通透性仪器编号3.0.8mol/L甲醇溶液4.TritonX-100溶液5.0.8mol/mL的丙三醇溶液宏观变化：图3加0.0085%NaCl溶液后的细胞形图2加入后30s，细胞悬液出现溶血现象：图4加入后8s，细胞悬液发生溶血现象：（右为等渗对照，左为实验组）由深红色溶液变为透明、颜色较浅的溶液。图5加0.8mol/L甲醇溶液后细胞形态：（10×40）：溶血之后，仍是细胞破裂，...
