组织脱水过程中脱脂办法的研究Thestudyofhowtoremovefatduringtissuedehydration丁伟1#，周立新2#，唐巍2，应李雄1，姚洪田1，张淼2，唐蒙蒙1，张晟2摘要：在病理常规解决中富含脂肪的组织经常会出现脱水、透明不佳，造成制片不全、质量较差，切片困难等现象。乙醇和二甲苯被认为在组织解决环节起到脱水及透明的作用，但在传统流程中的实际效果往往不佳。我们通过把传统脱水、透明流程中使用的无水乙醇二甲苯液改为无水乙醇、二甲苯液等量混合液进行脱水、脱脂、透明，获得了令人满意的效果。核心词：组织解决、脱脂、无水乙醇、二甲苯、无水乙醇二甲苯混合液病理组织制备环节中脂肪的解决始终是比较困难的事情，在传统观念中认为高浓度酒精含有一定的脱脂作用。当解决含有大量脂肪组织的时候建议延长高浓度乙醇的解决时间以期得到好的成果，但最后往往不能令人满意。二甲苯始终被认为是一种媒介试剂，二甲苯既能与乙醇混合，又能溶解石蜡，因此在其间起到置换乙醇，接引石蜡的媒介作用，在这一过程中组织块内的乙醇最后被二甲苯所取代。我们通过对乙醇和二甲苯在组织脱水、脱脂中作用的研究，并在浙江大学医学院附属第一医院和北京大学肿瘤医院2个单位同时进行实验认证，采用无水乙醇与二甲苯1：1混合的方式进行组织解决，运用乙醇与二甲苯协同作用，脱水、脱脂共同进行，得到了满意的成果，现介绍以下。1.材料和办法：1.1试剂和设备：75%乙醇、85%乙醇、95%乙醇、无水乙醇、二甲苯，达科为全封闭脱水机，樱花全封闭脱水机，克拉泰切片机，徕卡2235切片机。1.2材料：通过提取的猪油；不同部位的手术标本组织；脱水机内通过试剂及沉淀物。基金项目：科技部数字诊疗装备研发课题（YFC0114104）1.浙江大学医学院附属第一医院；2.北京大学肿瘤医院#第一作者、通讯作者丁伟，浙江大学第一附属医院病理科周立新，北京大学肿瘤医院病理科1.3办法：1.3.1实验一：取相似份量提炼的动物脂肪（猪油），分别加入95%乙醇、无水乙醇和二甲苯，观察猪油不同时间段的变化状况。1.3.2实验二：将富含脂肪的人肠系膜及结肠组织经10%中性缓冲福尔马林固定16小时后，直接放入75%乙醇、95%乙醇、无水乙醇、二甲苯、无水乙醇和二甲苯（1:1）混合液中，放置最长24小时，观察组织以及试剂的变化。1.3.3实验三：将286块带脂肪的人体胃肠组织、乳腺组织手术标本一分为二，二分之一按照75%乙醇60分钟、85%乙醇60分钟、95%乙醇（I）120分钟、95%乙醇（II）120分钟、无水乙醇（I）60分钟、无水乙醇（II）60分钟、二甲苯（I）45分钟、二甲苯（II）45分钟传统流程解决。另二分之一按照75%乙醇60分钟、85%乙醇60分钟、95%乙醇（I）120分钟、95%乙醇（II）120分钟、无水乙醇60分钟、无水乙醇+二甲苯（1：1）60分钟、无水乙醇+二甲苯（1：1）45分钟、二甲苯45分钟改良流程解决。对2种解决流程解决的组织进行石蜡包埋，常规切片，以脂肪组织切片的完整与破损作为评分原则，进行切片质量比较。1.3.4对传统及改良流程中95%乙醇、无水乙醇、无水乙醇+二甲苯（1：1）的沉淀物进行油红O染色。1.3.5统计前一种月采用传统办法解决的日常工作切片质量与采用改良办法后一种月日常工作的切片质量，评分原则采用用等级医院检查原则。1.3.6对改良流程中95%乙醇、无水乙醇、无水乙醇+二甲苯（1:1）试剂内的沉淀物进行微谱分析。2.成果2.1实验一：猪油倒入二甲苯10秒内就被彻底溶解；倒入95%乙醇的猪油，浸泡48小时后，无明显变化；倒入无水乙醇的猪油，浸泡48小时后，外表略干燥，并出现少量细小的颗粒悬浮在试剂里（见图1）。2.2实验二：固定充足的富含脂肪人肠及系膜组织分别放入75%乙醇、95%乙醇、无水乙醇、二甲苯、无水乙醇+二甲苯（1:1）混合液24小时后，肉眼可见组织在75%乙醇、95%乙醇、无水乙醇无明显变化；倒入二甲苯的组织，组织里的水将二甲苯隔离开来，产生乳白色的油水隔离膜；而放入无水乙醇+二甲苯（1:1）混合液的组织开始出现透明状（见图2）。2.3286块带脂肪的人体胃肠组织、乳腺组织采用传统与改良流程的切片质量，见附表1：附表1：286块带脂肪的人体胃肠组织、乳腺组织采用传统与改良流程的切片质量比较质胃（72...
