实验一 普通光学显微镜实验一 普通光学显微镜结结构构与与使用方法使用方法杭州师范大学 陈建明一、实验目的和要求 • 了解显微镜的构造和各部分的作用，掌握显微镜的使用技术和保养措施 • 学会简易临时玻片的制作方法和生物绘图方法 二、实验内容• 在显微镜下练习观察动、植物玻片标本。• 制作洋葱鳞叶内表皮细胞临时装片，进行显微镜操作练习。• 在显微镜下观察池塘水样中的微小生物。三、相关知识与实验原理三、相关知识与实验原理要知道的几个重要的分辨率要知道的几个重要的分辨率• 人眼：人眼： 0.20.2mm/250mmmm/250mm• 光学显微镜：光学显微镜： 0.20.2umum• 电子显微镜：电子显微镜： 0.20.2nmnm 显微镜是观察细胞的主要工具。根据光源不同，可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。前者以可见光（紫外线显微镜以紫外光）为光源，后者则以电子束为光源。1. 光学显微镜 普通生物显微镜由 3 部分构成：① 照明系统：包括光源和聚光器。② 光学放大系统：由物镜和目镜组成， 是显微镜的主体。③ 机械装置：用于固定材料和观察方便， 包括镜台 ( 载物台 ) 、调节器和、 物镜转换器 ( 旋转器 ) 等。 尼康 E-600 显微镜 显微镜概述显微镜概述普通光学显微镜的构造目镜粗准焦螺旋 镜筒细准焦螺旋转换器物镜镜臂聚光器反光镜镜座2. 荧光显微镜 尼康 E800 荧光 DIC 显微镜 荧光显微镜照片（微管呈绿色、微丝红色、核蓝色） 3. 激光共聚焦扫描显微镜 LCSM 照片蓝色为细胞核，绿色为微管 4. 暗视野显微镜 dark field microscope• 聚光镜中央有挡光片，视野背景是黑的，只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜，物体边缘是亮的。• 可观察 4~200nm 的微粒子，分辨率比普通显微镜高 50 倍。把透过标本的可见光的光程差变成振幅差，从而提高了各种结构间的对比度，使各种结构变得清晰可见。在构造上，相差显微镜有不同于普通光学显微镜两个特殊之处。1.环形光阑（ annular diaphragm ）：位于光源与聚光器之间。2.相位板（ annular phaseplate ）：物镜中加了涂有氟化镁的相位板，可将直射光或衍射光的相位推迟 1/4λ 。5. 相差显微镜Four types of light microscope● Bright-field microscope: the image obtained by the simple transmission of light through a cell in culture● Dark-field microscope: the cell appears as a bright...
