第一章基因工程的概念第一节 基因工程诞生的 理论基础一. 确定了遗传信息的携带者是DNA而不是蛋白质。明确了遗传的物质基础问题 1. 肺炎双球菌转化实验 1944年 Avery ，确定了基因的分子载体是DNA，而不是蛋白质。 2. 噬菌体转染实验 1952年 Alfred Hershy和 Marsha Chase 进一步证明遗传物质是DNA 二. 揭示了 DNA分子的双螺旋结构模型和半保留复制机理，解决了基因的自我复制和传递的问题。 1953年 James D. Watson 和 Francis H. C. Crick揭示了 DNA分子的双螺旋结构和半保留复制机制。三. 提出了“中心法则”和操纵子学说，并成功地破译了遗传密码，从而阐明了遗传信息的流向和表达问题 1958 年 Crick 又提出了遗传信息传递的“中心法则” 1964 年 Marshall Nirenberg和 Gobind Khorana 等终于破译了 64 个遗传密码 F.Jacob和J.Monod在1961年提出了操纵子学说http://baike.baidu.com/view/225864.htm 第二节 基因工程诞生的 技术 基础DNA分子的体外切割与连接1. 限制性内切酶（ restriction enzymes） Werner Arber 理论预见限制酶 1968年 H.O. Smith等分离出第一种限制性核酸内切酶 Daniel Nathans 用限制酶切得SV40 DNA片断 3人于 1978 年获得 Nobel 生理或医学奖2. DNA 连接酶（ ligase ） 1967 年 5 个实验室几乎同时发现了DNA连接酶二. DNA 分子的核苷酸序列分析1975 年 F. Sanger 、A. Maxam 和 W. Gilbert发明了 DNA快速测序技术 , 1980年 Nobel 化学奖三. 载体的构建1972四. 转化技术1970 年 M. Mandel 和 A. Higa发现经过氯化钙处理的大肠杆菌容易吸收噬菌体DNA。1972 年 S. Cohen发现这种处理过的细菌同样能吸收质粒DNA 五. 琼脂糖凝胶电泳和southern 转移杂交技术 1960s发明了琼脂糖凝胶电泳，可将不同长度的DNA分离开 ;DNA 印迹技术由Southern 于 1975 创建 ,称为 Southern 印迹技术二. 基因工程的定义和特征1. 定义在体外将核酸分子插入病毒、质粒或其它载体分子，构建遗传物质的新组合，并使之渗入到原先没有这类分子的寄生细胞内，而能持续稳定地繁殖在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体 DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物第二章酶学基础1 拷贝数就是指某目的基因（可以是质粒）在某一生物群体或个...
