湖南农业大学基因工程重点,更具老师整理。VIP免费

1909 年，丹麦生物学家，创造了基因(gene)一词1944 年，美国著名微生物学家 O.T. Avery 证明了基因的物质基础是 DNA 1953 年，J. Watson 和 F. Crick 的 DNA 双螺旋结构模型, 揭示了 DNA 的分子结构. 特别是DNA 半保留复制规律。DNA 的半保留复制复制子：由复制起点开始合成的一段 DNA 序列。复制起点：在大肠杆菌中其复制起点由 245 个碱基对组成，由两段保守的重复序列组成。1958 年，F. Crick 提出了描述 DNA、RNA 和蛋白质三者关系的所谓中心法则 (central dogma) 5.基因的表达与调控（操纵子学说）基因依其功能差别可以分成调节基因、操纵基因和结构基因三大类。一、基因工程的概念是指按照人们的科研或生产需要，在分子水平上，用人工方法提取或合成不同生物的遗传物质（DNA 片段），在体外切割、拼接形成重组 DNA，然后将重组 DNA 与载体的遗传物质重新组合，再将其引入到没有该 DNA 的受体细胞，进行复制和表达，生产出符合人类需要的产品或创造出新性状，并能稳定地遗传给下一代。供体、受体和载体称为基因工程的三大要素。技术上的三大发明：DNA 分子的体外切割与连接技术、基因工程载体的使用、DNA 分子的核苷酸序列分析技术、琼脂糖凝胶电泳和 Southern 转移杂交等技术基因工程的主要研究内容或步骤分、从复杂的生物有机体基因组中，分离出带有目的基因的 DNA 片段。切、在体外，用限制性内切核酸酶切割目的基因和基因载体，以利于将两者连接形成重组体接、在体外，将带有目的基因的外源 DNA 片段连接到能够自我复制并具有选择记号的载体分子上，形成重组 DNA 分子。 转、将重组 DNA 分子转移到适当的受体细胞（亦称寄主细胞），并与之一起增殖筛、从大量的细胞繁殖群体中，筛选出获得了重组 DNA 分子的受体细胞克隆表。外源基因的高效表达的措施：1、提高外源基因的剂量2、筛选、修饰充足基因表达的转录调控元件：启动子，增强子，上游调控序列，操作子，终止子3、修饰和构建蛋白质生物合成的翻译调控元：选择、修饰和重组核糖体结合位点及密码子等 mRNA 的翻译调控原件，强化受体细胞中蛋白的生物合成过程。这些涉及到基因表达调控的分子生物学原理。4、工程菌的稳定生产与增殖：合理控制微型生物反应器的增值速度和最终数量。第二章 基因操作基本技术 第一节 凝胶电泳技术电泳是指带电粒子在电场中向与自身带相反电荷的电极移动的现象。电泳技术就是利用在电场的作用下...