五子衍宗方主要药效学成分药代动力学方法研究项目完成单位:国家药物及代谢产物分析研究中心项目完成人: 马 辰 五子衍宗方为中药经典古方,源自唐代《悬解录》。其功用主治为补肾益精,用于治疗肾虚腰痛,尿后余沥,以及不孕不育症等。中国药典以成方制剂五子衍宗丸形式收载,其处方组成为:菟丝子 400g、枸杞子 400g、覆盆子 200g、车前子 100g 和五味子 50g。在五子衍宗方中菟丝子和枸杞子为方中的君药。目前中国药典对五子衍宗丸仅有性状和定性鉴别,未有含量测定。 菟丝子为旋花科植物菟丝子 Cuscuta chinensis Lam. 的干燥成熟种子,为常用中药,具有滋补肝肾、固精缩尿、安胎、明目、止泻等作用,其中黄酮类化合物为主要成分。目前从菟丝子中提取并鉴定出结构的黄酮类成分有金丝桃苷、槲皮素、紫云英苷、山奈酚等。目前中国药典 2000 版一部中,未对菟丝子进行含量测定。菟丝子中含有的主要化学成分以槲皮素及其苷为主,其中金丝桃苷为含量较高的槲皮素苷,因此对菟丝子和五子衍宗方进行含量测定时,以金丝桃苷为指标成分,其理化性质及结构如下: 物理性状:淡黄色针状结晶(乙醇),熔点 227~230℃(237~239℃分解),比旋度[α]20D=-83。(C=0.2 吡啶),易溶于甲醇、乙醇、丙酮及吡啶。 金丝桃苷化学结构:一、五子衍宗方及菟丝子中金丝桃苷的含量测定1 实验材料及仪器设备1.1 药品及试剂 金丝桃苷对照品:本所植化室提供,纯度达 95%以上 五子衍宗方药材(菟丝子、枸杞子车前子、覆盆子、五味子):北京同仁堂药店磷酸(分析纯); 无水乙醇(分析纯);乙腈(色谱纯);Fisher 甲醇:(色谱纯);双蒸水 1.2 仪器设备 Waters 2690 高效液相色谱仪及 996-二极管阵列检测器,Millennium32 色谱软件,有机相微孔滤膜(0.45µm)针头滤器,BUCHI 461 电热恒温水浴箱2 色谱条件选择菟丝子及五子衍宗方中黄酮类成分较多,其中菟丝子中以槲皮素及其苷为主,五子衍宗方中除菟丝子含有黄酮类成分外,车钱子中也含有车钱苷等黄酮类成分。参考文献对菟丝子及五子衍宗中的金丝桃苷测定的色谱条件进行了优选。2.1 检测波长的选择从金丝桃苷的紫外光谱 Fig. 1 可见,其在 254nm 和 355nm 均有较大的吸收,文献中多以 355nm 作为对金丝桃苷的检测波长,主要考虑其它干扰成分在此吸收较低。因此本论文对菟丝子中含量测定时,首先考虑了 355nm 作为检测波长,而对五子衍宗方进行含量测定时,其他成...