关于汽酒中微生物的检查1 主题内容与适用范围 本标准规定了出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌的检验方法。 本标准适用于出口食品的检验。2 设备和材料2.1 吸管: 1mL,具 0.1mL 刻度；5mL 和 10mL,具 1mL 刻度。2.2 水浴箱：44.5±0.5℃。2.3 培养箱：36±1℃,44.5±0.5℃。2.4 冰箱: 0～5℃和-15～-20℃。2.5 均质器。2.6 乳钵和研棒。2.7 平皿：直径 90mm。2.8 天平：感量 0.1g。2.9 显微镜。2.10 稀释瓶：100mL、200mL 和 500mL 三角烧瓶及广口瓶。2.11 玻璃珠：直径约 5mm。2.12 菌落计数器。3 培养基及试剂3.1 月桂基硫酸盐胰蛋白(月示)(LST)肉汤。3.2 煌绿乳糖胆盐(BGLB)肉汤。3.3 EC 肉汤。3.4 伊红美蓝琼脂(EMB)。3.5 营养琼脂斜面。3.6 色氨酸肉汤。3.7 MR-VP 培养基。3.8 Korser 氏枸椽酸盐肉汤。3.9 结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA)。3.10 Butterfield 氏磷酸盐缓冲稀释液。3.11 生理盐水。3.12 革兰氏染色液。3.13 Kovacs 氏靛基质试剂。3.14 甲基红指示剂。3.15 Voges-pros kauer(V-P)试剂。4 样品制备4.1 以无菌操作取有代表性的样品。如有包装则用 75％乙醇在开口处擦拭后取样。若不能及时检验,应将冷冻样品置于-15℃保存；非冷冻而易腐的食品,应置于 4℃冰箱保存。检验前冷冻样品可于 2～5℃ 18h 内解冻,或在 45℃以下 15min 内解冻。4.2 不同食品样品匀液的制备4.2.1 液体食品以灭菌吸管取样 25mL 放入装有 225mL 稀释剂的灭菌玻璃瓶(瓶内预置适当数量的玻璃珠),以 30cm 幅度、于 7s 内振摇 25 次(或以机械振荡器振摇),制成 1:10 的样品匀液。4.2.2 固体和半固体食品 以无菌操作取 25 g 样品,放入装有 225 mL 稀释剂的灭菌均质杯内,于 8000 r/min 均质 1～2min,制成 1:10 样品匀液(也可用灭菌乳钵研磨的方法代替)。4.3 稀释样品匀液根据对样品污染情况的估计,用稀释剂将样品匀液制成一系列十倍递增的样品稀释液,如 10**-2、10**-3、10**-4……。从制备样品匀液至稀释完毕,全过程不得超过 15min。5 大肠菌群的测定5.1 大肠菌群 MPN 值的测定5.1.1 对每个样品,选择适宜的三个连续稀释度的样品稀释液。每个稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白(月示)(LST)肉汤,每管接种 1mL。5.1.2 将接种管置于 36±1℃培养 48±2h。5.1.3 观察试管的产气情况：检查倒管内是否有气泡产生,记录在 24h 和 48h 内产气的LST 肉汤管数。如...
