【 分 享 】 PCR 污 染 与 对 策 PCR 污 染 与 对 策 PCR 反 应 的 最 大 特 点 是 具 有 较 大 扩 增 能 力 与 极 高 的 灵 敏 性 ， 但 令 人 头 痛 的 问 题 是 易 污 染 ， 极 其 微 量 的 污 染即 可 造 成 假 阳 性 的 产 生 . 污 染 原 因 (一 )标 本 间 交 叉 污 染 :标 本 污 染 主 要 有 收 集 标 本 的 容 器 被 污 染 ， 或 标 本 放 置 时 ， 由 于 密 封 不 严 溢 于 容 器外 ， 或 容 器 外 粘 有 标 本 而 造 成 相 互 间 交 叉 污 染 ;标 本 核 酸 模 板 在 提 取 过 程 中 ， 由 于 吸 样 枪 污 染 导 致 标 本 间 污染 ;有 些 微 生 物 标 本 尤 其 是 病 毒 可 随 气 溶 胶 或 形 成 气 溶 胶 而 扩 散 ， 导 致 彼 此 间 的 污 染 . (二 )PCR 试 剂 的 污 染 :主 要 是 由 于 在 PCR 试 剂 配 制 过 程 中 ， 由 于 加 样 枪 、 容 器 、 双 蒸 水 及 其 它 溶 液 被 PCR核 酸 模 板 污 染 . (三 )PCR 扩 增 产 物 污 染 .这 是 PCR 反 应 中 最 主 要 最 常 见 的 污 染 问 题 .因 为 PCR 产 物 拷 贝 量 大 (一 般为 1013拷 贝 /ml)， 远远高 于 PCR 检测数个拷 贝 的 极 限， 所以极 微 量 的 PCR 产 物 污 染 ， 就可 造 成 假 阳 就可 形 成 假 阳性 . 还有 一 种容 易 忽视， 最 可 能 造 成 PCR 产 物 污 染 的 形 式是 气 溶 胶 污 染 ；在 空气 与 液 体面摩擦时 就可 形 成气 溶 胶 ， 在 操作时 比较 剧烈地摇动反 应 管， 开盖时 、 吸 样 时 及 污 染 进样 枪 的 反 复吸 样 都可 形 成 气 溶 胶 而 污染 .据计算一 个气 溶 胶 颗粒可 含48000 拷 贝 ， 因 而 由 其 造 成 的 污 染 是 一 个值得特 别重视的 问 题 . (四)实验室中 克隆质粒的 污 染 :在 分 子生 物 学实验室及 某些 用克隆质粒做阳 性 对 照的 检验室， 这 个问 题也比较 常 见 .因 为 克隆质粒在 单位容 积内含量 相 当高 ， 另外 在 纯化过 程 中 需用较 多的 用具 及 试...
