完整版GPX、APX、CAT、SOD、AsA、GSH、MDA、Proline、可溶性蛋白、可溶性还原糖、可溶性总糖测定方法VIP免费

一、抗氧化酶活性测定（ APX、GPX、SOD、CAT、Pro）参考《在同一提取系统中同时测定 5 种抗氧化酶活性》1、注意事项：在本提取系统中同时测定抗坏血酸专一性过氧化物酶（APX）、愈创木酚过氧化物酶（ GPX）、超氧化物歧化酶（ SOD）、过氧化氢酶（ CAT）、可溶性蛋白共 5 个指标；所有操作过程必须在冰浴中完成，降低保护酶活性的损失；称量药品时可稍稍过量。2、提取液及反应准备液配置：以下溶液1-7d 内可用， 4℃保存。1mol/L HCl （100ml）：8.333ml 浓 HCl 定容至 100ml。750mM（750mmol/L） H 2O2（100ml）：7.570mL 30%H2O2定容至 100ml。500mM H2O2（100ml）：5.0464mL 30%H2O2定容至 100ml。10mM H2O2（100ml）：2mL 500mM H2O2定容至 100ml。（1）配置 500ml 提取液所需试剂药品如下：药品用量Tris 3.0285g HCl(1mol/L) 22.5ml 甘油100ml EDTA（乙二胺四乙酸二钠）0.18612g AsA（抗坏血酸）0.08806g DTT（二硫苏糖醇）0.07713g GSH（谷胱甘肽）0.15366g MgCl2 0.50825g 蒸馏水溶解后（终体积为 450ml 左右），0.1mM的 HCl 和 NaOH调节 pH至 7.0 ，然后定容至 500ml。（2）500ml A 液配置所需试剂药品如下：药品用量Tris 3.0285g HCl(1mol/L) 22.5ml EDTA（乙二胺四乙酸二钠）0.18612g 蒸馏水溶解后（终体积为 450ml 左右），0.1mM的 HCl 和 NaOH调节 pH至 7.8 ，然后定容至 500ml。（3）500ml B 液配置所需试剂药品如下：蒸馏水溶解后（终体积为 450ml 左右），0.1mM的 HCl 和 NaOH调节 pH至 7.0 ，然后定容至 500ml。3、GPX反应液配置（ 100ml）：现用现配， 24h 内有效。反应液： 111ul 愈创木酚用 5ml 乙醇溶解后加入 1ml 500mM H2O2，用 B 液定容至 100ml。4、APX反应液配置（ 100ml）：现用现配， 24h 内有效。反应液： 1ml 10mM H2O2用 B液定容至 100ml；30mM AsA：0.52836gAsA 用 B 液定容至 100ml。5、SOD反应液配置（ 100ml）：现用现配， 24h 内有效。反应液： 0.0082gNBT和 0.1995g 蛋氨酸（甲硫氨酸）用A液定容至 100ml。0.1mM 核黄素溶液： 0.00376gVB2 用 A 液定容至 100ml。6、CAT反应液配置（ 100ml）：直接使用 B液即可。7、可溶性蛋白反应液：G-250 考马斯亮蓝： 100mg考马斯亮蓝溶于50ml90%（V/V）乙醇，加入85%（质量浓度） H3PO4100ml，再用蒸馏水定容至1000ml，常温下保存 1 个月。8...