实验二 病料的采集、保存及送检 一、目的 掌握被检病料的采取、保存、送检的方法
二、材料 实验动物(鸡)、瓷盘、剪子、镊子、酒精灯、酒精、接种环、载玻片、火柴棒等
三、病料的采取 1
采取病料的基本原则 (1)采集最适病料 理想的病料,应是无菌采取的含病原微生物量高的血液、器官组织或分泌物和排泄物
因此要根据疾病的病性采取合适的病料,如无法估计是何种疾病时,应根据临床症状和病理变化采集病料或全面采取病料
取材时应注意病原微生物感染所致疾病的类型(如呼吸道感染疾病、胃肠道感染疾病、皮肤和粘膜性疾病、败血性疾病等)、病原微生物的侵入部位、病原微生物感染的靶器官等
细菌检验病料应当是采自未经抗菌药物治疗的患病动物,并且应多做几张涂片
(2)适时采集 采集病料的时间一般在疾病流行早期、典型病急性期,此时病原微生物的检出率高;后期由于体内免疫力的产生,病原微生物减少,检测病原微生物比较困难,同时可能出现交叉感染,增加判断的困难性
在采集供抗体测定用的血清时,可适时地采集急性期和恢复期的两份血清样品,一般两份血清的间隔时间为14~2ld
内脏病料的采取,须于动物死后立即进行;夏季最迟不超过4~6h,冬天不超过24h,否则时间过长,由肠内侵入其他细菌,致使尸体腐败,有碍于病原菌的检出
供做切片的样品采取后必须立即投入固定液,否则时间过长,会使细菌和组织细胞死亡、溶解,影响检验结果
有条件做现场培养时,剖开尸体后应进行接种培养,然后采样,最后剖检
(3)无菌操作 采集病料所用的器械及容器要进行严格的消毒:刀、剪、镊子等金属用具可煮沸消毒30min,使用前最好用酒精擦拭,并在火焰上烧一下;器皿(玻制、陶制及珐琅制等)在高压灭菌器或干烤箱内灭菌;软木塞和橡皮塞应高压灭菌;载玻片用2%~5%碳酸钠煮沸消毒5~10min,煮沸后用清水冲洗干净,拭干保存或浸泡于95%酒精中以备使用;注射器和