浙 江 大 学 2003—2007 考 研 生 物 化 学 真 题 （ 含 解 析 ） 2003、 真 题 解 析 1、 简 述 SDS-聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 得 基 本 原 理 ， 你 使 用 该 技 术 分 离 和 检 测 过 何 种 物 质 ？ 主要 操 作 步 骤 有 哪 些 ？ 该 题 是 实 验 操 作 中 的 常 考 题 SDS－ PAGE： 当 SDS 与 蛋 白 质 结 合 后 ， 蛋 白 质 分 子 即 带 有 大 量 的 负 电 荷 ， 从 而 掩 盖 了天 然 蛋 白 质 分 子 间 的 电 荷 差 别 。 与 此 同 时 蛋 白 质 在 SDS 的 作 用 下 结 构 变 得 松 散 ， 形 状 趋 向一 致 ， 所 以 各 种 SDS -蛋 白 质 复 合 物 在 电 泳 时 产 生 的 泳 动 率 差 异 ， 只 反 映 了 分 子 量 的 差 异 ，即 纯 利 用 分 子 筛 效 应 ， 按 蛋 白 质 分 子 量 大 小 进 行 分 离 ， 分 子 量 越 大 移 动 越 慢。 应 用 SDS－ 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 还可以 用 于未知蛋 白 分 子 量 的 测 定， 在 同 一 凝 胶 上对一 系列已知分 子 量 的 标准蛋 白 及未知蛋 白 进 行 电 泳 ， 测 定各 个的 标准蛋 白 的 电 泳 距离 （ 或迁移 率 ），并对各 自分 子 量 的 对数（ log Mr） 作 图， 即 得 到标准曲线。 测 定未知蛋 白 质 的 电 泳 距离 （ 或迁移 率 ）， 通过 标准曲线就可以 求出未知蛋 白 的 分 子 量 。 SDS－ 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 经常 应 用 于提纯 过 程中 纯 度的 检 测 ， 纯 化 的 蛋 白 质 通常 在SDS 电 泳 上应 只 有 一 条带 ， 但如果蛋 白 质 是 由不同 的 亚基 组成的 ， 它在 电 泳 中 可能会形 成分 别 对应 于各 个亚基 的 几条带 。 SDS－ 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 具有 较高的 灵敏度， 一 般只 需要不到微克量 级的 蛋 白 质 ， 而 且通过 电 泳 还可以 同 时 得 到关于分 子 量 的 情况， 这些 信息对于了解 未知蛋 白 及设计提纯 过 程都是 非常 重要 的 。 SDS－ 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 可用 于单链ＤＮＡ、寡...
