选修三 P2 基因工程 核心：构建重组 DNA 分子 定向改造生物的技术 实质：基因重组 是狭义的遗传工程（广义的遗传工程泛指把一种生物的遗传物质（细胞核、染色体脱氧核糖核酸等）移到另一种生物的细胞中去，并使这种遗传物质所带的遗传信息在受体细胞中表达
） 理论基础：DNA 是生物遗传物质的发现、DNA 双螺旋结构的确立、遗传信息传递方式的认定 技术保障：限制性核酸内切酶、DNA 连接酶（前两者为基因的分离和重组提供了必要的手段）和质粒载体的发现与应用 限制性核酸内切酶：识别和切割 DNA 分子内一小段特殊核苷酸序列的酶 细菌中分离出 对 DNA 分子上不同的特定的核苷酸序列进行识别和切割 切割的是磷酸二酯键 粘性末端、平末端 将一个基因从DNA 分子上切割下来，需要切两处，同时产生 4 个粘性末端 识别序列 eg GAATTC DNA 连接酶：作用：将具有末端碱基互补的 2 个DNA 片段连接在一起，形成的 DNA 分子成为重组 DNA 分子 DNA 聚合酶需要模板，DNA 连接酶不需要 连接的是磷酸二酯键 质粒：能够自主复制的小型双链环状DNA 分子，在细菌中以独立于染色体之外的方式存在，是一种特殊的遗传物质 质粒作为载体的条件：1、能自我复制 2、具有切割位点 3、有标记基因，以供重组 DNA 的鉴定和选择 质粒可以从真核生物（酵母菌），微生物中获取 质粒可在自身细胞、受体细胞、体外（PCR 技术）复制 载体：质粒、λ噬菌体（前两者能把外源基因载入到大肠杆菌等宿主细胞中）、植物病毒、动物病毒（后两者把外源基因分别载入到植物细胞和动物细胞内） P5 基因工程的原理和技术 基本原理：让人们感兴趣的基因（即目的基因）在宿主细胞中稳定和高效地表达 步骤：一、获得目的基因 方法一：目的基因的序列已知：化学合成（胰岛素基因）or 聚合酶链式反应（PCR）扩增｛在短时间内形成大量 D
