几种常用的固定剂 固定剂最先应用在光学显微技术中，但光学显微镜中使用的沉淀凝集蛋白性的固定剂对电镜并不特别适用。于是人们引入四氧化锇和中性甲醛进行固定。早期的电镜生物样品化学固定法都采用四氧化锇单一固定，但四氧化锇不能很好地保存糖原和其它碳水化合物，而且四氧化锇在组织中的渗透速度比较慢（约2mm/h）。而早期使用的中性甲醛也令人很不满意，因为早期使用的甲醛很不纯，含有甲酸和甲醇的残留（一般有10-15％），甲醇的存在对样品的保存很不利，于是后来人们改进了甲醛的制备方法，使用多聚甲醛新鲜配制甲醛，提高了它的纯度。1963 年Sabatini、Bensch 和Barrnett 推荐使用醛类（特别是戊二醛）作为初级固定剂。使用戊二醛或戊二醛-多聚甲醛初步固定后再使用四氧化锇后固定的双重化学固定对大多数动物和植物组织都十分有效，因而成为目前大多数实验室常规的固定方法。 电镜中使用的固定剂都有毒性，操作时都要很小心，尽可能在通风橱 中完 成操作。如 果 实验室中发 生固定剂泄 漏 ，必 须 立 即 用大量 奶 粉 覆 盖 泄 漏 出 来的溶 液 ，待 反 应充 分后收 集处 理 。 四氧化锇（Osmium tetroxide） 四氧化锇是一种很强 的氧化剂，呈 浅 黄 色 结 晶 ，分子 量 254，饱 和水溶 液 的浓 度为7.24％，它的水溶 液 为中性，有极 大毒性。市 售 有密 封 的四氧化锇晶 体和四氧化锇水溶 液 两 种。四氧化锇晶 体 溶 于水的速度很慢，必 要时可以 使用超 声波 设 备来加 速溶 解 。市 面 上 也有已 经 配制好的2％四氧化锇水溶 液 出 售 ，使用相当 方便 。但要特别注 意的是无 论 是四氧化锇晶 体 还 是水溶 液 都会 挥 发 出 四氧化锇气 体 ，因此 应将 四氧化锇置 于密 闭 容 器 （玻 璃 容 器 ）中保存。四氧化锇气 体 对呼吸 系 统 有刺 激 ，对眼 睛 有严 重的破 坏 作用，因此 在使用时应特别小心，尽可能在通风橱 中进行，并且严 格 控 制用量 。废 弃 的四氧化锇溶 液 应加 入酒 精 水溶 液 或硫酸亚 铁 溶 液 ，使四氧化锇转 化为黑 色 沉淀，以 降 低 毒性方便 收 集处 理 。 四氧化锇作为固定剂有如 下 优 点 ： 1,四氧化锇可以 与 脂 类、糖类和蛋白质 反 应。其对脂 类的固定作用可以 补 充 醛类固定剂对脂 类固定不足 的缺 点 。其反 应方...
