辣根过氧化物酶辣根过氧化物酶催化机理及应用催化机理及应用目录辣根过氧化物酶的来源辣根过氧化物酶(HRP)简介其同工酶——HRPC辣根过氧化物酶的催化机制辣根过氧化物酶的应用一、辣根过氧化酶的来源辣根是十字花科多年生草本植物,它的根有辛辣味,可用作调味品或烹饪食用,根同时还含有一种含量丰富的过氧化物酶——辣根过氧化物酶
二、辣根过氧化酶(HRP)1、HRP广泛分布于植物界,它是由无色的酶蛋白和棕色的铁卟林结合而成的糖蛋白,在过氧化氢存在时能催化苯酚、苯胺及其取代物聚合
2、HRP的同工酶种类极多
3、虽然它们都是以铁卟林为辅机的血红素蛋白,但是彼此间在分子量、含糖量和等电点等方面却不太相同
同工酶1、同工酶:指能催化相同化学反应,但酶本身的分子结构组成、理化性质、免疫功能和调控特性等方面有所不同的一组酶
2、同工酶不仅存在于同一个体的不同组织中,也存在于同一组织、同一细胞的不同亚细胞结构中,甚至存在于不同发育期的组织中
三、辣根过氧化物酶同工酶C其中以中性辣根过氧化物酶同工酶C的含量颇为丰富,也是应用最广泛的一种
HRPC单肽链是由308个氨基酸构成的,肽链上存有二硫键(4个由两分子Cys组成的),还含有一个盐桥(是Arg123和Asp99构成)
HRPC二级结构HRPC含有两个不同的金属中心:血红素和两个钙原子
血红素中铁原子的一个轴向结合点与肽链上His170侧链的N原子结合,使血红素垂直连接在His170上
HRPC三级结构酶的结构总体上看来大部分是α-螺旋,但其中也包含一些小的β-折叠
网状为血红素;球型为钙原子;螺旋型为α螺旋;尖头所指为β折叠
四、辣根过氧化物酶的作用机理辣根过氧化物酶的作用机理可分以下几步:第一步,形成有活性的酶一底物复合物Ⅰ:HRP+H2O2→复合物Ⅰ第二步,复合物Ⅰ转变成有活性的复合物Ⅱ:复合物Ⅰ+AH→复合物Ⅱ+A(AH:表示还