生物选修三 易考知识点背诵 专题1 基因工程 基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外DNA重组和转基因技术,赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品
基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,又叫做DNA重组技术
(一)基因工程的基本工具 1
“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶) (1)来源: 主要是从原核生物(微生物)中分离纯化出来的
(2)功能: 能够识别双链 DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性
(3)结果: 经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:黏性末端(中心轴线的两侧)和平末端(中心轴线) 大肠杆菌的一种限制酶(EcoRⅠ)能识别 GAATTC序列,SmaI识别 CCCGGG序列: 他们识别的核苷酸序列不同,但是切点都是在G↓C之间
(4)比较有关的DNA酶 (1)DNA水解酶:能够将DNA水解成四种脱氧核苷酸,彻底水解成膦酸、脱氧核糖和含氮碱基 (2)DNA解旋酶:能够将DNA或DNA的某一段解成两条长链,作用的部位是碱基和碱基之间的氢键
注意:使DNA解成两条长链的方法除用解旋酶以外,在适当的高温(如94℃)、重金属盐的作用下,也可使 DNA解旋
(3)DNA聚合酶:能将单个的核苷酸通过磷酸二酯键连接成DNA长链
(4)DNA连接酶:是通过磷酸二酯键连接双链 DNA的缺口
注意比较DNA聚合酶和DNA连接酶的异同点
“分子缝合针”——DNA连接酶 (1)两种 DNA连接酶(E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶)的比较: ①相同点:都缝合磷酸二酯键
②区别: E·coliDNA连接酶来源于大肠杆菌,只能将双链 DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶来自T4噬