实验报告实验名称溶血素与补体激活实验日期院 系专 业班 级姓 名学 号一、实验目的1，熟记溶血素制备的基本流程2．认识免疫办法对抗体产生的影响3．分析补体激活及生物学功效的影响因素4．评价补体溶血实验的拓展与应用二、实验器材器材无菌注射器、无菌玻璃瓶、手术剪、镊子、止血带、酒精棉球、无菌棉签、天平、试管、试管架、锥形瓶、胶头滴管、废液缸、离心机、兔台、手术剪、眼科剪、注射器、烧杯、电动移液枪、水浴锅、记号笔、冰箱、镊子、平皿、200 目细胞滤网、研磨棒、酒精灯、恒温培养箱试剂碘酒、灭菌生理盐水、甘油、Hank’s 液三、实验原理1.溶血素(Hemolysin)：以绵羊红细胞（SRBC）作为抗原免疫实验动物所获得的抗体（抗-SRBC），被称为溶血素。2.补体(Complement)：补体系统涉及 30 余种成分，存在于人或脊椎动物血清、组织液和细胞膜表面。是一组经活化之后才含有酶活性的糖蛋白。3.补体典型激活途径大白兔产生的抗体与绵羊红细胞上抗原表位结合，抗体构造变化，暴露补体结合部位，与C1qrs 结合，C1q 构象变化，使 C1r 与 C1s 裂解 C4 和 C2，大片段 C4b 和 C2a 结合成 C3 转化酶，小片段进入液相。 C3 转化酶裂解 C3，再与大片段 C3b 结合形成 C5 转化酶（C4b2a3b）。C5 转化酶裂解 C5，C5b 与 C6、C7 结合于绵羊红细胞膜上，再与 C8 结合，再与 12-16 个C9 结合形成 MAC（攻膜复合物）。红细胞膜上形成孔道，致死量钙离子内流，绵羊红细胞裂解。4. 补体结合反映实验原理补体结合反映是一种有补体参加，并以绵羊红细胞和溶血素作为批示系统的抗原抗体反映。参加本反映的五种成分可分为两个系统：一为待检系统，即为已知抗原（或抗体）和待检抗体（或抗原）；另一种为批示系统，即绵羊红细胞和其对应的溶血素。待检抗原、抗体和补体作用后，再加入批示系统。若待检系统中的抗原和抗体相对应，两者特异性结合后激活补体，补体被消耗。再加入的批示系统无补体结合，不出现溶血；若待检系统中的抗原与抗体不对应或缺少一方，补体不被激活，当批示系统加入后，绵羊红细胞和溶血素复合物激活补体，产生溶血现象。5. 空斑形成实验是一种体外检测 IgM、IgG 类型抗体产生细胞的实验办法，又称空斑形成细胞（ PFC)测定。可作为评定药品影响抗体产生水平以及临床筛选抗肿瘤新药的重要根据。经绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞与一定量的绵羊红细胞混合后，抗体形成细胞产生的抗体与绵羊红细胞结...
