凯氏定氮法检测N 含量凯氏定氮原理:测定化合物或混合物中总氮量的一种方法
即在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐(消化炉 SBS800),然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气馏出并为过量的酸液吸收,再以标准碱滴定,就可计算出样品中的氮量(凯氏定氮仪 D4000)
由于蛋白质含氮量比较恒定,可由其氮量计算蛋白质含量,故此法是经典的蛋白质定量方法
蛋白质是含氮的有机化合物
食品与硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵
然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,即为蛋白质含量
整个过程可以使用德国 OMNILAB 凯氏定氮系统进行检测
反应化学方程式:1
有机物中的胺根在强热和 Cu SO4,浓 H2SO4 作用下,硝化生成(NH4)2SO4反应式为:2NH2+H2S04+2H=(NH4)2S04 (其中Cu SO4 做催化剂)2
在凯氏定氮器中与碱作用,通过蒸馏释放出 NH3 ,收集于 H3BO3 溶液中反应式为:(NH4)2SO4+2NaOH=2NH3+2H2O+Na2SO42NH3+4H3BO3=(NH4)2B4O7+5H2O3
用已知浓度的H2SO4(或HCI)标准溶液滴定,根据 HCI 消耗的量计算出氮的含量,然后乘以相应的换算因子,既得蛋白质的含量反应式为:(NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O=(NH4)2SO4+4H3BO3(NH4)2B4O7+2HCl+5H2O=2NH4Cl+4H3BO3凯氏定氮仪操作说明书Food ALYT D40001、 开机前准备:蒸馏水容器、NaOH 溶液容器、H3BO3 溶液容器
自来水管或冷却水循环水器
32%氢氧化钠溶液,2%-4%的硼酸溶液
2、 开机前连接好 NaOH 进样管、H3BO3 进样管、稀释水进水管、蒸汽水