分子生物学大实验——目的基因的克隆及表达VIP免费

1 分子生物学大实验——目的基因的克隆及表达 第一节 基因操作概述 ............................................................................................................. 2 一、聚合酶链式反应(PCR) ............................................................................................. 2 二、质粒概述 ................................................................................................................... 4 三、凝胶电泳 ................................................................................................................... 5 四、大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 ....................................................................... 6 五、重组质粒的连接 ....................................................................................................... 6 六、限制性内切酶消化 ................................................................................................... 7 七、SDS-PAGE 蛋白质电泳 ........................................................................................... 7 第二节 材料、设备及试剂 ..................................................................................................... 7 一、材料 ........................................................................................................................... 7 二、设备 ........................................................................................................................... 8 三、试剂： ....................................................................................................................... 8 第三节 操作步骤 ..................................................................................................................... 9 一、目的基因的获得： ................................................................................................... 9 二、pET-21bT（pET-21bR、pET-21b）载体的获得： .............................................. 11 三、pET-21b等与目的片段的连...