培养基的常规配制程序 一、目的要求 了解培养基的配制原理
了解培养基常规配制程序
了解培养基配制过程各环节的要求和注意事项
二、基本原理 正确掌握培养基基的配制方法是从事微生物学实验工作的重要基础,由于微生物种类及代谢类型的多样性,因而用于培养微生物培养基的种类也很多,它们的配方及配制方法虽各有差异
但一般培养基的配制程序却大致相同,例如器皿的准备,培养基的配制与分装,棉塞的制作,培养基的灭菌,斜面与平板的制作以及培养基的无菌检查等基本环节大致相向
三、实验材科 (一)药品 待配各种培养的组成成分,琼脂,1mol/L NaOH溶液,1mol/l (升,统一用大写)HCl溶液
(二)仪器 天平或台秤,高压蒸汽灭菌锅
(三)玻璃器皿 移液管、试管、烧杯、量筒、锥形瓶、培养皿、玻璃漏斗等
(四)其他物品 药匙、称量纸、pH试纸、记号笔、棉花、纱布、线绳、塑料试管盖、牛皮纸、报纸等
四、实验内容 (一)玻璃器皿的洗涤和包装 1.玻璃器皿的洗涤 玻璃器皿在使用前必须洗刷干净
将锥形瓶、试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的水中,用毛刷刷洗,然后用自来水及蒸馏水冲净
移液管先用含有洗涤剂的水浸泡
再用自来水及蒸馏水冲洗,洗刷干净的玻璃器皿置于烘箱中烘干后备用
2.灭菌前玻璃器皿的包装 (1)培养皿的包装 培养皿由一盖—底组成一套
可用报纸将几套培养皿包成一包,或者将几套培养皿直接置于特制的铁皮圆筒内,加盖灭菌
包装后的培养皿须经灭菌之后才能使用
(2)移液管的包装 在移液管的上端塞入—小段棉花(勿用脱脂棉)
它的作用是避免外界及口中杂菌吹入管内,并防止菌液等吸入口中
塞入此小段棉花应距管口约 0
棉花自身长度约 1-1.5cm
塞棉花时,可用一外圈拉直的曲别针,将少许棉花塞入管口内
棉花要塞得松紧适宜,吹时以能通气而又不使棉花滑下为准
先将报纸裁成宽约