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培养基的常规配制程序VIP免费

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培养基的常规配制程序 一、目的要求 了解培养基的配制原理。 了解培养基常规配制程序。 了解培养基配制过程各环节的要求和注意事项。 二、基本原理 正确掌握培养基基的配制方法是从事微生物学实验工作的重要基础,由于微生物种类及代谢类型的多样性,因而用于培养微生物培养基的种类也很多,它们的配方及配制方法虽各有差异。但一般培养基的配制程序却大致相同,例如器皿的准备,培养基的配制与分装,棉塞的制作,培养基的灭菌,斜面与平板的制作以及培养基的无菌检查等基本环节大致相向。 三、实验材科 (一)药品 待配各种培养的组成成分,琼脂,1mol/L NaOH溶液,1mol/l (升,统一用大写)HCl溶液。 (二)仪器 天平或台秤,高压蒸汽灭菌锅。 (三)玻璃器皿 移液管、试管、烧杯、量筒、锥形瓶、培养皿、玻璃漏斗等。 (四)其他物品 药匙、称量纸、pH试纸、记号笔、棉花、纱布、线绳、塑料试管盖、牛皮纸、报纸等。 四、实验内容 (一)玻璃器皿的洗涤和包装 1.玻璃器皿的洗涤 玻璃器皿在使用前必须洗刷干净。将锥形瓶、试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的水中,用毛刷刷洗,然后用自来水及蒸馏水冲净。移液管先用含有洗涤剂的水浸泡。再用自来水及蒸馏水冲洗,洗刷干净的玻璃器皿置于烘箱中烘干后备用。 2.灭菌前玻璃器皿的包装 (1)培养皿的包装 培养皿由一盖—底组成一套。可用报纸将几套培养皿包成一包,或者将几套培养皿直接置于特制的铁皮圆筒内,加盖灭菌。包装后的培养皿须经灭菌之后才能使用。 (2)移液管的包装 在移液管的上端塞入—小段棉花(勿用脱脂棉)。它的作用是避免外界及口中杂菌吹入管内,并防止菌液等吸入口中。塞入此小段棉花应距管口约 0.5cm左有。棉花自身长度约 1-1.5cm。塞棉花时,可用一外圈拉直的曲别针,将少许棉花塞入管口内。棉花要塞得松紧适宜,吹时以能通气而又不使棉花滑下为准。 先将报纸裁成宽约 5cm左右的长纸条,然后将已塞好棉花的移液管尖端放在长条报纸的一端,约成 45度角,折叠纸条包住尖端,用左手握住移液管身,右手将移液管压紧,在桌面上向前搓转,以螺旋式包扎起来。上端剩余纸条,折叠打结,准备灭菌(见图 5—1—1)。 (二)液体及固体培养基的配制过程 1.液体培养基配制 (1)称量一般可用 1/100粗天平称量配制培养基所需的各种药品。先按培养基配方计算各成分的用量,然后进行准确称量。 (2)溶化 将称好的药品置于一烧杯中,先加入少量水(根据实验需要可用自来...

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