第1页（共24页） DNA 重组技术的基本工具和基因工程的基本操作程序 一．基因工程的概念 基因工程是指 ，通过 技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出 。基因工程是在 水平上进行设计和施工的，又叫做 。 二．基因工程的基本工具 1.限制性核酸内切酶（限制酶） （1）来源： 。 （2）功能： 。 （3）结果：产生的DNA 片段末端通常有两种形式： 。 2. DNA 连接酶 (1)两种DNA 连接酶（E·coliDNA 连接酶和T4-DNA 连接酶）比较： ①相同点： 。 ②区别： （2）与 DNA 聚合酶作用的异同: 3.载体 （1）载体具备的条件： （2）最常用的是 其它载体： 三．基因工程的基本操作程序 第一步： 原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有 。 ２.PCR 技术扩增目的基因 第2页（共24页） （1）原理： （2）过程：： 。 第二步： 1.目的： 。 2.组成： （1）启动子： 。 （2）终止子： 。 （3）标记基因的作用： 。 第三步： 2.常用的方法： a、将目的基因导入植物细胞方法： 。 b、将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是 。此方法的受体细胞多是 。 C、将目的基因导入微生物细胞：最常用的原核细胞是 ，其转化方法是： 。 第四步： 1.首先要检测 ，方法是采用 。 2.其次还要检测 ，方法是采用 。 3.最后检测 ，方法是 ，用 。 4.有时还需进行 的鉴定。如 转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。 课堂深化探究 一．对基因工程概念的理解 别名 基因拼接技术或 DNA 重组技术 操作环境 操作对象 操作水平 第3页（共24页） 基本过程 结果 与杂交育种相比 与诱变育种相比 原理 二．基因工程的基本操作工具 1．与 DNA 分子相关的酶 (1)几种酶的比较 种类 项目 限制酶 DNA 连接酶 DNA 聚合酶 解旋酶 作用底物 作用部位 作用特点 作用结果 (2)限制酶与 DNA 连接酶的关系 2．载体 (1)作用 (2)具备的条件 (3)种类 第4页（共24页） 特别提醒 ①一般来说，天然载体往往不能满足人类的所有要求，因此人们根据不同的目的和需要，对某些天然的载体进行人工改造。 ②限制酶切割位点所处的位置必须是在所需的标记基因之外，这样才能保证标记基因的完整性，有利于对目的基因的检测。 三．基因工程操作程序 基因工程技术生产凝乳酶的过程 1．基因工程的操作程序分析 (1)目的基因的获取途径 (2)基因表达载体的构建 特...
