- 1 - By V_First 选修三《现代生物技术》 基因工程 1
（2012全国卷新课标版）40．现代生物科技专题（15 分）根据基因工程的有关知识，回答下列问题：· （１）限制性内切酶切割ＤＮＡ分子后产生的片段，其末端类型有 黏性末端 和 平末端
（２）质粒运载体用 EcoRⅠ切割后产生的片段如下： 为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA 除可用 EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是 能识别与 EcoR I 相同的核苷酸序列
（３）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA 连接酶有两类，即 大肠杆菌 DNA 连接酶和 T4 DNA 连接酶
（４）反转录作用的模板是 mRNA ，产物是 cDNA
若要在体外获得大量反转录产物，常采用 PCR 技术
（５）基因工程中除质粒外， 动物病毒 和 噬菌体 也可作为运载体
（６）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体 细 胞 ，原 因是 未 处 理 的大 肠 杆 菌 不 易 吸 收 重 组 质粒
（2 0 1 2 福建卷）32．现代生物科技专题 肺细胞中的let-7 基因表达减弱，癌基因RAS 表达增强，会引发肺癌
研究人员利用基因工程技术将 let-7 基因导入肺癌细胞实验表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制
该基因工程技术基本流程如图１
请回答： （１）进行过程①时，需用 限制 酶切开载体以插入 let-7 基因
载体应用 RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动 let-7 基因转录，该部位称为 启动子
- 2 - By V_First （２）进行过程②时，需用 胰蛋白 酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养
（３）研究发现，let-7 基因能影响 RAS 的表达，其影响机理如图２
据图分析，可从细胞提取 RNA 进行分
