微生物程度检查办法验证方案1.目的：为确认所采用的办法适合于该药品的微生物程度检查，涉及细菌、霉菌及酵母菌计数和控制菌检查，特制订本验证方案，通过比较实验菌的恢复生长成果，来评价整个检查办法的精确性、有效性和重现性，以确认供试品在该实验条件下无抑菌活性或其抑菌活性可无视不计，所采用的办法合用于该品种的微生物程度检查。 验证过程应严格按照本方案规定的内容进行，若因特殊因素确需变更时，应填写验证方案修改申请并报验证领导小组同意2.范畴：本验证方案合用于微生物程度检查办法的验证。3.规范性引用文献： 根据《中国药典》二部附录Ⅺ J 微生物程度检查法的规定，由于某些供试品含有抗菌活性，在建立微生物检查办法或产品的组分发生变化或原检查法的检查条件发生变化时，可能影响检查成果的精确性，必须对供试品的抑菌活性及测定办法的可靠性进行验证。4.验证明施： 实验前的准备: 实验用品的准备：将实验需用的试管、刻度吸管、薄膜过滤器、滤膜（孔径、直径 50mm）、平皿、空三角瓶、称量纸等，用牛皮纸包扎好后，放于湿热灭菌器中，在 121℃，灭菌 30 min，在 3 天内使用。 实验用培养基的制备：取合用性检查合格的营养琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基、营养肉汤培养基、胆盐乳糖培养基（BL）、改良马丁琼脂培养基、4-甲基伞形酮葡糖苷酸培养基（MUG）等脱水培养基，按摄影应的配制阐明，用纯化水配制、分装后，在 2 小时内，放于湿热灭菌器中，在 121℃，灭菌 15 min，在 3 周内使用。 实验用稀释剂/缓冲液、冲洗液的制备：取在使用期内的试剂，按摄影应的配制办法，配制无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液、%无菌氯化钠溶液、%（ml/ml）聚山梨酯 80 的%无菌氯化钠溶液等，用纯化水配制，加热使溶，过滤，分装，在121℃，灭菌 15 min，在 3 周内使用。 实验菌的制备和稀释： 细菌、霉菌及酵母菌计数办法验证用菌液： 控制菌检查办法验证用菌液： 取上述均匀培养物（菌悬液），用%无菌氯化钠溶液对倍稀释，制成每1ml 含菌 10～100cfu 的实验菌液。 供试液的制备： 根据供试品的理化特性与生物学特性，采用适宜的办法制备供试液。 ，取供试品养胃舒软胶囊 5g，加至含溶化的（温度不超出 45℃）5g 司盘80、3g 单硬脂酸甘油酯、10g 聚山梨酯 80 无菌混合物的烧杯中，用无菌玻璃搅拌成团后，慢慢加入 45℃无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至 100ml，边加边搅拌，使供试品充足乳化，作为 1：20 ...
