紫外线诱变选育α-淀粉高产菌株 一、实验目的 1
学习菌种的物理因素诱变育种基本技术
通过诱变技术筛选出高产ɑ-淀粉酶 的菌株
二 、实验原 理 紫外线是 一种最 常 用 有 效 的物理诱变因素,其 诱变效 应 主 要 是 由 于 它 引 起 DNA 结 构 的改 变而形 成 突 变型
紫外线诱变, 一般 采 用 15W 或 30W 紫外线灯 , 照 射 距 离 为 20-30cm, 照 射 时 间依 菌种而 异 , 一般 为 1-3min, 死 亡 率 控 制 在 50% -80% 为 宜
被 照 射 处 理的细 胞 , 必 须 呈 均匀 分 散 的单 细 胞 悬 浮 液 状 态 , 以 利 于 均 匀 接 触 诱变剂 , 并 可 减 少 不 纯 种的出现
同 时 , 对 于细 菌细 胞 的生 理状 态 则 要 求 培 养 至 对 数 期 为 最 好
本实验以 紫外线处 理产淀粉酶 的枯 草 杆菌, 通过透明圈法初筛, 选择淀粉酶 活力高的生 产菌株
三、实验材料 1
菌种 产淀粉酶 枯 草 芽孢杆 菌 2
器材 装有 15W 或 30W 紫外灯 的超净工作台、电磁力搅拌器(含转子)、低速离 心机 、培 养 皿 、涂 布 器、10mL 离 心管 、(1、5、10mL)吸 管 、250mL 三角 瓶 、恒 温 摇 床 、培 养 箱 、直 尺 、棉 签 、橡 皮 手 套 、洗 耳 球 3
培 养 基和 试 剂 ① 无 菌水 、75%酒 精 ② 0
5% 碘 液 碘 片 1g、碘 化 钾 2g、蒸 馏 水 200mL, 先 将 碘 化 钾 溶 解 在 少 量 水 中 , 再 将 碘片 溶 解 在 碘 化 钾 溶 液 中 , 待 碘 片 全 部 溶 解 后 , 加 足 水 即 可
③ 选择培 养 基 可 溶 性 淀粉2g, 牛 肉 膏 1g, NaCl