微生物实验一微生物染色法和光学显微镜的使用VIP专享VIP免费

实验内容一、显微镜油镜的使用与保护一、显微镜油镜的使用与保护二、细菌基本形态与特殊结构的观察（标本）三、细菌的涂片制作和革兰染色法（示教）三、细菌的涂片制作和革兰染色法（示教）目的要求•熟悉显微镜油镜的使用与保护熟悉显微镜油镜的使用与保护•了解光学显微镜的结构与使用了解光学显微镜的结构与使用•掌握细菌基本形态的观察掌握细菌基本形态的观察•掌握细菌特殊结构的观察及其意义掌握细菌特殊结构的观察及其意义•掌握细菌的涂片和革兰氏染色法掌握细菌的涂片和革兰氏染色法一、显微镜油镜的使用与保护•1.光学显微镜结构•2.显微镜油镜的识别•3.显微镜油镜的原理显微镜油镜的原理•4.4.镜下观察内容镜下观察内容•5.5.显微镜油镜的使用方法显微镜油镜的使用方法•6.6.显微镜油镜的保护显微镜油镜的保护油镜的识别：•刻有“100X”或“OIL”字样•有一圈白线作为标记•物镜上标有放大倍数、数值孔径（NA）、工作距离、要求盖玻片的厚度物镜介质折射率介质折射率↑→↑→数值孔径数值孔径NA↑→NA↑→显微镜分显微镜分辨率辨率↑↑镜下观察内容镜下观察内容染色性染色性个体形态个体形态群体排列群体排列二、细菌基本形态与特殊结构的观察1.1.细菌的基本形态细菌的基本形态•球菌球菌•杆菌杆菌•螺形菌螺菌螺形菌螺菌弧菌弧菌球菌球菌个体形态群体形态圆球形近似球形：肾形、矛头形等双球菌：脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌链球菌：溶血性链球菌、肺炎链球菌葡萄球菌：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌其他：四联球菌、八叠球菌形态杆菌杆菌群体形态单个分散不规则存在（大肠杆菌）链状排列——链杆菌（炭疽芽胞杆菌）平齐、钝圆、尖细或膨大成棒状个体形态形态螺旋菌螺旋菌霍乱弧菌。幽门螺杆菌。弧菌螺菌螺旋菌菌体细长并且形成弯曲细菌的基本形态（标本）2.2.细菌的特殊结构细菌的特殊结构荚膜：肺炎链球菌荚膜：肺炎链球菌鞭毛：变形杆菌鞭毛：变形杆菌芽胞：破伤风梭菌芽胞：破伤风梭菌（（11）荚膜：）荚膜：糖被的一种，包被于某些细菌细胞壁外的一层厚度不定的胶状物质。15粘液层菌胶团荚膜16功能①保护细菌免受干燥的影响；②贮藏养料，以备营养缺乏时重新利用；③透性屏障和离子交换系统；④表面附着作用；⑤细菌间的信息识别作用；⑥堆积代谢废物。细菌的特殊结构（标本）细菌的特殊结构（标本）荚膜：荚膜：肺炎链球菌肺炎链球菌（吕氏美兰染色法）（吕氏美兰染色法）（（22）鞭毛：）鞭毛：具有推动细菌运动功能，“运动器官”。细菌的特殊结构（标本）细菌的特殊结构（标本）•鞭毛：鞭毛：变形杆菌变形杆菌（镀银染色法）（镀银染色法）（（33）芽孢：）芽孢：某些细菌在其生长发育后期，在细胞内形成一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量极低、抗逆性极强的休眠体，称为芽孢。21芽孢有较强的抗热，抗辐射，抗化学物和抗静水压的能力。是否能消灭芽孢是衡量各种消毒灭菌手段的最重要的指标。芽孢是细菌的休眠体，在适宜的条件下可以重新转变成为营养态细胞；产芽孢细菌的保藏多用其芽孢。产芽孢的细菌多为G+，杆菌，也有一些球菌。芽孢的有无、形态、大小和着生位置是细菌分类和鉴定中的重要指标。细菌的特殊结构（标本）细菌的特殊结构（标本）•芽胞：芽胞：破伤风梭菌破伤风梭菌（负染色法）（负染色法）三、细菌的涂片制作和革兰染色法11、细菌的涂片制作、细菌的涂片制作•菌种：大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌18-24h营养琼脂斜面培养物•器材及试剂：载玻片、接种环、酒精灯及无菌生理盐水、结晶紫、卢戈氏碘液、95%乙醇、石炭酸复红。•方法：（1）.涂片（2）.干燥（3）.固定22、革兰染色法、革兰染色法•革兰染色液：结晶紫染液、碘液、95%酒精、蕃红。•方法：初染初染媒染媒染脱色脱色复染复染1min1min1min1min30s30s30s-1min30s-1minGram金黄色葡萄球菌大肠埃希菌◆结晶紫—初染◆碘液--媒染◆乙醇--脱色◆蕃红--复染简单染色法简单染色法革兰氏染色法革兰氏染色法革兰染色法原理：革兰染色法原理：26GG--细菌的细胞壁厚度细菌的细胞壁厚度较较GG++细菌薄细菌薄，肽聚糖含量少且交联，肽聚糖含量少且交联程度低，脂含量丰富，脱色后通透性增加，易复...