如何阅读基因载体图谱基因载体是基因工程的核心，也是基因治疗中强有力的生物工具，我们先来认识和阅读载体图谱吧。一、载体分类及载体组成元件载体分类 1、按属性分类：病毒载体和非病毒载体病毒载体是一种常见的分子生物学工具，可将遗传物质带入细胞，原理是利用病毒具有传送其基因组进入目的细胞，进行感染的分子机制。可发生于完整活体或是细胞培养中。可应用于基础研究、基因疗法或疫苗。用于基因治疗和疫苗的病毒载体应具备以下基本条件：（1）携带外源基因并能包装成病毒颗粒；（2）介导外源基因的转移和表达；（3）对人体不致病；（4）在环境中不会引起增殖和传播。非病毒载体一般是指质粒 DNA。2、按进入受体细胞的类型分类：原核载体、真核载体、穿梭载体（含原核和真核 2 个复制子，能在原核和真核细胞中复制，并可以在真核细胞中有效表达）。3、按功能分类：克隆载体、表达载体克隆载体：具有克隆载体的基本元件（Ori,Ampr,MCS 等），可以携带 DNA 片段或外源基因进入受体细胞并克隆和大量扩增DNA 片段（外源基因）的载体。表达载体：克隆载体中加入一些与表达调控（具有转录/翻译所必需的 DNA 顺序）有关的元件即成为表达载体。载体组成元件 1、复制起始位点 Ori：即控制复制起始的位点。Ori 的箭头指复制方向，其他元件标注的箭头多指转录方向（正向）。2、抗生素抗性基因：可以便于加以检测，如 Amp+,Kan+（1）Ampr：水解B-内酰胺环，解除氨苄的毒性。（2）tetr:可以阻止四环素进入细胞。（3）camr：生成氯霉素羟乙酰基衍生物，使之失去毒性。（4）neor（kanr）：氨基糖苷磷酸转移酶，使G418（卡那霉素衍生物）失活。（5）hygr：使潮霉素 B 失活。3、多克隆位点：MCS 克隆携带外源基因片段，它具有多个限制酶的单一切点，便于外源基因的插入。如果在这些位点外有外源基因的插入，会导致某种标志基因的失活，便于筛选。决定能不能放目的基因以及如何放置目的基因。还要再看外源 DNA 插入片段大小。质粒一般只能容纳小于 10kb 的外源DNA 片段。一般来说，外源 DNA 片段越长，越难插入，越不稳定，转化效率越低。4、P/E：启动子/增强子 5、Terms:终止信号 6、加 poly（A）信号：可以起到稳定 mRNA 作用示例阅读载体:pENTER 载体 1）humanORF+pENTER 载体2）CMV 启动子，T7 启动子 3）ORF 的 C 端融合了 Flag 和Histag4）多克隆位点，常用 AsisI 和 Mlul（人源基因上不常见的）4）SV40poly...
