9.8 doud 污染物高效降解微生物的分离培养微生物是地球生态系统中最重要的分解者,也是人类生存环境的重要组成部分,同时也是人类极其宝贵的资源库。它与人类的生产、生活, 对人类的生存发展,有着十分密切的关系。人们在治理污染、保护环境的不懈努力中,在为遇到种种难题所困扰的同时,已经自觉或不自觉地利用并发挥着环境有益微生物的作用,而且在实践中越来越认识到微生物在污染物降解、资源再生利用、绿色产品生产、生态环境保护等方面的重要作用和巨大潜力。获取高效菌种是开发应用环境有益微生物、并进一步实现产业化的基础,是该领域研究、开发工作的源头,也是产业化发展的核心与关键。9.8.1 分离培养的基本原则和方法9.8.1.1 确定分离培养目标了解目标菌(微生物)的分布、营养、生长等特点,以及它们具有的或应具有的一些功能特性,并进而制定试验方案。如用于生物脱氮或NH 3-N 去除、转化的硝化细菌和反硝化细菌的分离, 前者应是具有氨氧化作用的亚硝酸细菌和能氧化亚硝酸为硝酸的硝酸细菌。又如用于有机生活垃圾的快速处理与利用的高效微生物的分离,这些微生物的作用应能有效地使垃圾达到无害化、减量化、资源化,因此它们的发酵温度应该很高,即应具有耐高温的特性,以及对蛋白质、纤维素等有机物的很高的分解能力。9.8.1.2 选择分离源以目标微生物上述特征为依据,选择并确定分离源。该分离源应具备以下条件:(1)所处的条件较有利于目标微生物的生长。(2)存在有较大的数量。(3)有可能具备为目标菌设定的功能特性。9.8.1.3 分离“筛”的设定是选择培养法的核心(1)选择培养基的利用。根据目标微生物特定的营养要求,设计相应的选择培养基。例如, 可利用不加氮源的培养基来分离固氮菌;解酚菌的培养基中应以酚作为碳源。(2)选择培养条件的利用。可利用目标菌对氧、光、pH、温度、盐分、压力等的不同要求来设定选择培养条件。例如, 可用摇床培养来满足好氧菌生长时对氧的要求;为分离芽孢杆菌,可利用芽孢耐高温的特性,预先对样品用800C 水浴处理 10~20 分钟。(3)对毒物、抗菌素等特殊的敏感性或耐受性的利用。例如,分离放线菌时可加重铬酸钾来抑制细菌和霉菌生长,其加量为每300ml 改良高氏一号培养基中加3%重铬酸钾 1ml。9.8.1.4 分离样品的破碎、分散处理进行微生物分离培养前,必须对分离样品,如土壤、淤泥、活性污泥或生物膜等等充分破碎、 分散,尽可能使着生在土壤粒子内外的微生物、组...