人凝血因子ⅷ的分离纯化工艺制作人：龙益如班级：144092ThePreparationProcedureofHumanCoagulationFactorⅷ1相关背景012FⅧFⅨ相关背景013人凝血因子Ⅷ是人血浆中一种非常重要的凝血因子，其缺失或缺乏会引起不同程度的甲型血——友病一种连锁隐性遗传的出血性疾病，严重时甚至会危及患者的生命。甲型血友病是一种终生性疾病，目前仍没有根治的方法，只能通过输注产品进行替代性治疗。相关背景014性质内容结构六个结构域，结构复杂分子量330KD等电点4.3左右血浆含量0.1-0.2μg/ml半衰期12h相关背景015原材料：人新鲜冰冻血浆主要杂质：人纤维蛋白原、人纤维结合蛋白、白蛋白、其他凝血因子等分离纯化工艺026关键步骤：分离纯化工艺027冷沉淀中所含杂质：杂质分子量等电点人纤维蛋白原340KD5.2-5.6人纤维结合蛋白450KD5.5左右白蛋白67KD4.7-4.9FⅨ56KD4.0-4.6FⅡ72KD4.1FⅦ50KD4.0-4.6FⅩ59KD4.1-4.6分离纯化工艺0282.乙酸缓冲液调节pH——等电点沉淀法调节温度为15℃，pH6.3左右去除等电点较高的人纤维白蛋白和人纤维结合蛋白分离纯化工艺0293.Al(OH)3——吸附吸附分离法（负吸附）使用Al(OH)3作为吸附剂，通过预实验确定铝胶含量为12%。由于该吸附剂为两性离子，在pH7.1（预实验确定）左右时带正电，易于吸附小分子酸性蛋白，去除FⅨ、FⅡ、FⅦ、FⅩ等分离纯化工艺02104.DEAE650M——弱阴离子交换凝胶离子交换层析固定层析过程为pH7.0,通过调节缓冲液盐浓度来改变蛋白结合能力，进行洗脱。梯度洗脱方案：分离纯化工艺0211分离纯化工艺02125.病毒灭活（1）S/D处理法灭活脂包膜病毒（2）10030min℃干热灭活法灭活非脂包膜病毒谢谢您的观看与聆听制作人：龙益如班级：144092ThePreparationProcedureofHumanCoagulationFactorⅷ13
