生物笔记 1 第四章、细胞生物学的研究技术 （简单了解，考试题目较简单） 一显微镜 1 普通显微镜（light microscope）: 主要用于染色标本的观察 2 相差显微镜（phase contrast microscope）: 用于观察培养的活细胞(无色的细胞) 倒置相差显微镜适用于观察体外培养的活细胞的结构和活动 3 微分干涉差显微镜(DIC 显微镜)： 适用于活细胞之类的无色透明标本的观察，广泛应用于各种细胞工程中的显微操作 4 暗视野显微镜：适用于无色透明标本的观察（活细胞），但不可以观察到细胞的内部结构 5 激光扫描共聚焦显微镜：荧光检测、细胞结构的三维重建；、微操作、定点破坏培养物中的某些细胞，实现对某些特定细胞的保留 6 荧光显微镜：检测细胞表面或内部特定的抗原 二．亚显微结构的观察 1 电子显微镜（electron microscope）：透射电镜 TEM 用于观察和研究细胞内部细微结构；扫描电镜 SEM 用于观察标本表面精细的三维形态结构；高压电镜 2 扫描探针显微镜：扫描隧道显微镜;原子力显微镜 三 .细胞的分离与培养 （1）细胞的分离：利用物理性质不同（沉降和离心）；利用不同类型细胞与玻璃或塑料的黏附能力不同；利用抗体特异性结合的特性；采用带有荧光染料的特异性抗体来标记悬液中的某些特定细胞，然后采用流式细胞仪将被标记的细胞分离出来（悬液：用蛋白质水解酶处理组织块，并加入一定量的乙二胺四乙酸EDTA 以结合溶液中的 Ca2+，再通过轻微振荡使组织解散） （2）细胞的培养（cell cu ltu re）:从组织分离出来特定的细胞在一定条件进行培养，使之能够继续生存生长以至增殖的一种方法，分为原代培养和传代培养 细胞在体外生长的条件：培养基；支持物；其他（CO2 浓度、适宜的温度、PH） A 原代培养：由起始实验材料所进行的细胞培养 B 对已有的细胞（原代培养所得的培养物或已有的培养物）进行继续培养 C 细胞系：通过原代培养所得的细胞培养物（可以含有原代培养所用的起始实验材料的所含细胞） D 细胞株（cell strain）：由单一类型的细胞所组成的细胞系 四．细胞融合（cell fu sion）:是指两个或两个以上的细胞相互接触并且合并而形成一个细胞（基因型相同的细胞形成融合称为同核融合，基因型不同的细胞形成的融合称为并核融合）;细胞融合的方法：生物诱导法，化学诱导法，物理诱导法 五．细胞连接（cell ju nction）: A 封闭连接occlu ding ju nction（又称紧密连接tight ju ...
