生化制药大试验葛根素的提取分离和精制

葛根素的提取、分离和精制一、实验目的1. 建立对生化物质提取、分离及精制过程的认识2. 了解溶剂萃取法、吸附分离法、柱层析法及结晶的基本原理3. 掌握大孔吸附树脂的分离原理和基本操作4. 掌握葛根素的提取、分离和精制方法二、实验原理葛根（Radix Puerariae ）为豆科植物野葛Pueraria lobata （Willd ．）ohwi 的根，是常用的中药，具有解肌退热、生津、透疹、升阳止泻等功效。葛根中含多种黄酮类成分，主要活性成分为大豆素 (daidzein）、大豆甙（ daidzin）、葛根素（ puerarin）、葛根素 -7-木糖甙（ puerarin-7-xyloside ）等。其主要成分为葛根素， 即 8-β-D-葡萄吡喃糖 -4,7-二羟基异黄酮。葛根素具有扩张冠脉和脑血管、降低心肌耗氧量、改善心肌收缩功能、促进血液循环等作用。适用于冠心病、心绞痛、心肌梗死、视网膜动脉静脉阻塞、突发性耳聋等疾病的治疗，效果显著。1. 萃取萃取（extraction）是利用溶质在互不相溶的两项之间分配系数的不同而使溶质得到纯化或浓缩的方法。 萃取是是工业生产中常用的分离、提取的方法之一。 如果含有目标产物的原料为固体， 则称此操作为液固萃取或浸取；如果含有目标产物的原料为液体，则称此操作为液液萃取。（1）液固萃取液固萃取通称浸取（leaching），是用液体提取固体原料中的有用成分的扩散分离操作。生物分离过程中经常需要利用液固萃取法从细胞或生物体中提取目标产物或除去有害成分。例如， 从咖啡豆中脱咖啡因，从草莓中提取花色苷色素，从植物组织中提取生物碱、黄酮类图 1 葛根皂苷等。 为了使固体原料中的溶质能够很快的接触溶剂，需对原料进行预处理，一般包括粉碎、研磨、 切片等。 固液萃取操作主要包括不溶性固体中所含的溶质在溶剂中溶解的过程和分离残渣和浸取液的过程。（2）液液萃取用溶剂从溶液中抽提物质叫液液萃取，也叫溶剂萃取。 根据所用萃取剂性质不同或萃取机制的不同， 液液萃取可分为多种类型。经典的液液萃取指的有机溶剂萃取，在生物产物中用于生物小分子的分离纯化。即在液体混合物 （原料液） 中加入一种与其基本不相混溶的液体作为溶剂， 构成第二相， 利用原料液中各组分在两个液相中的溶解度不同而使原料液混合物得以分离。选用的溶剂称为萃取剂，以S 表示；原料液中容易溶于S 的组分，称为溶质，以 A 表示；难溶于S 的组分称为原溶剂（或稀释剂），以 B 表示。液液萃取操作的基本过程：将一定量萃取剂加入原料液...