第一节紫外 -可见分光光度法一、紫外 - 可见吸收光谱紫外 -可见吸收光谱的产生1．分子吸收光谱的产生—— 由能级间的跃迁引起能级：电子能级、振动能级、转动能级跃迁：电子受激发，从低能级转移到高能级的过程2．分子吸收光谱的分类：分子内运动涉及三种跃迁能级，所需能量大小顺序3．紫外 -可见吸收光谱的产生由于分子吸收紫外-可见光区的电磁辐射，分子中价电子（或外层电子）的能级跃迁而产生（吸收能量 =两个跃迁能级之差）二、基本原理（一） Lamber-Beer定律：吸收光谱法基本定律描述物质对单色光吸收强弱与液层厚度和待测物浓度的关系假设一束平行单色光通过一个吸光物体讨论：1．Lamber-Beer 定律的适用条件（前提）入射光为单色光溶液是稀溶液Lamber-Beer 定律的描述了一束平行单色光穿过一定厚度液层时，吸光度与溶液浓度和光路长度之间的关系。A=-lgT=0lg II=ECL 式中 A- 吸光度，T-透光率， E-比例常数，C-被测物质溶液的浓度，L-光路长度。比例常数 E 是物质的物理常数， 它与入射光的波长和物质性质有关而与光的强度、溶液的浓度及液层厚度无关；随浓度C 单位的不同，吸收系数E 有不同的表示方法。当 C 以“ mol/L ”为单位时， E 称为摩尔吸收系数，用ε 表示；当用“g/100ml ”为单位时， E 称为百分吸收系数，用1%1cmE表示。在药品检验中使用百分吸收系数（1%1cmE），其物理意义是当吸光物质溶液的浓度为1%（ 1g/100ml ），液层厚度为1cm 时，在一定条件下的吸光度。2．该定律适用于固体、液体和气体样品3．在同一波长下，各组分吸光度具有加和性应用：多组分测定（二）吸光系数和吸收光谱1．吸光系数的物理意义：单位浓度、单位厚度的吸光度讨论：1）E=f （组分性质，温度，溶剂，λ ）当组分性质、温度和溶剂一定，E=f（λ ）2）不同物质在同一波长下E 可能不同（选择性吸收）同一物质在不同波长下E 一定不同3）E↑，物质对光吸收能力↑，定量测定灵敏度↑2．吸光系数两种表示法：1）摩尔吸光系数ε ：在一定λ 下， C=1mol/L ，L=1cm 时的吸光度A= ε CL 2）百分含量吸光系数/ 比吸光系数1%1cmE：在一定λ 下， C=1g/100ml ，L=1cm 时的吸光度A=1%1cmECL 3．吸收光谱（吸收曲线） ：λ ~A 4．吸光度测量的条件选择：1）测量波长的选择：2）吸光度读数范围的选择：选A=0.3~0.7 3）参比溶液 (空白溶液 )的选择：注：采用空白对比消除因溶剂和容器的吸收、光的散射和...
