随堂 ·真题演练1.(2012 ·全国新课标， 40)根据基因工程的有关知识，回答下列问题。(1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有________和________。(2)质粒运载体用 EcoR Ⅰ切割后产生的片段如下：为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA 除可用 EcoR Ⅰ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是____________________。(3)按其来源不同，基因工程中所使用的DNA 连接酶有两类，即 ________DNA连接酶和 ________DNA 连接酶。(4)反转录作用的模板是 ________，产物是 ______________________________。若要在体外获得大量反转录产物，常采用________技术。(5)基因工程中除质粒外， ________和________也可作为运载体。(6)若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是 ______________________________________________。解析此题考查基因工程应用的相关知识。(1)DNA分子经限制酶切割产生的DNA 片段末端通常有黏性末端和平末端两种类型。(2)为使运载体与目的基因相连，应使二者被切割后产生的末端相同，故用另一种限制酶切割产生的末端必须与 EcoR Ⅰ切割产生的末端相同。 (3)根据酶的来源不同， DNA 连接酶分为 E·coliDNA 连接酶和 T4DNA 连接酶。 (4)以 RNA 为模板，合成 DNA 的过程称为逆转录，若要体外获得大量DNA 分子，可以使用PCR 技术。 (5)在基因工程中，通常利用质粒作为运载体，另外噬菌体和动植物病毒也可作为运载体。(6)大肠杆菌作为受体细胞时， 常用 Ca2＋处理，使之成为能吸收周围环境中DNA 分子的感受态细胞。答案(1)黏性末端平末端(2)切割产生的 DNA 片段末端与 EcoR Ⅰ切割产生的相同 (其他合理答案也行)(3)大肠杆菌 (E·coli)T4(4)mRNA( 或 RNA)cDNA( 或 DNA)PCR(5)噬菌体动植物病毒(6)未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源 DNA) 的能力极弱2.(2015 ·江苏卷， 32)胰岛素 A、B 链分别表达法是生产胰岛素的方法之一。图1是该方法所用的基因表达载体， 图 2 表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程 (融合蛋白 A、B 分别表示 β -半乳糖苷酶与胰岛素A、B 链融合的蛋白)。请回答下列问题：(1)图 1 基因表达载体中没有标注出来的基本结构是________。(2)图 1 中启动子是 ________酶识别和结合的部位，有了它才能启动目的基因的表达；氨苄青霉素抗性基因的作用是___________...
