辅助生殖技术Assistedreproductivetechnology成都市计划生育技术指所男性科高坪常用专业术语Assistedreproductivetechnology,ART辅助生殖技术azoospermia无精子症basalbodytemperature,BBT基础体温biologicalfreezer生物冷冻仪blastocyst囊胚capacitation获能computer-assistedspermanalysis,CASA计算机辅助精子分析cryoprotectant冷冻保护剂glasswoolfiltration玻璃纤维过滤humanembryocryopreservation人类胚胎冷冻Humanspermbank人类精子库humanspermatozoaselectiontechnology人类精子优选技术intracytoplasmicsperminjection,ICSI精子卵浆内注射invitrofertilizationandembryotransfer,IVF-ET体外受精胚胎移植maleinfertilitysyndrome男性不育综合征oocyte-corona-cumuluscomplexes,OCCCs卵-冠-丘复合体partialzonadissection,PZD部分透明带切割法post-coitaltest,PCT性交后试验swim-up上游法zonadrilling透明带钻孔法zygote受精卵zygotene偶线期生物的两大特性生存种系繁衍辅助生殖技术的主要内容:人类精子优选技术X和Y精子的分离技术人工受精技术体外受精—胚胎移植技术显微授精技术胚胎冷冻复苏技术一.人类精子优选技术目的:在体外通过人工方法对精液进行处理,去除精浆及所含的有害物质,选择形态正常、活动力强的精子,病使精子在体外获能。精液的收集及检验常用的精子优选技术上游法Percoll密度梯度离心法玻璃纤维过滤法血清白蛋白过滤法二.X和Y精子的分离概述:目前已知约400多种遗传病是伴随X染色体的遗传病,通过X和Y精子分离技术及IVF—ET,可获得健康后代。例如:X连锁显性遗传病常见病种:抗维生素D佝偻病、遗传性肾炎、先天性眼球震颤、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症等。指导原则:(1)病残儿一、二级亲属无病时,可能是基因突变所致,再发风险低,可考虑再生育。(2)病残儿母亲患病时,每胎子女各有50%机会患病,再发风险高,不宜生育。(3)病残儿的父亲患病时,每胎女性均患病,男性则全部正常。经产前诊断可考虑生育男性胎儿。——《病残儿鉴定指南》X和Y精子的差异:精子膜表面电荷,核及形态学差异,PH敏感性,Y精子的乳酸脱氢酶,H-Y抗原,精子密度,泳动速度,运动性,DNA含量差异,奎丫因荧光染色,流式细胞仪,PCR,荧光原位杂交。常用方法上游法白蛋白柱分离法电泳法SephadexG50法密度梯度离心法流式细胞仪分选法改良上游法原理:Y精子在培养液(Ham,sF-10)中比X精子泳动快,密度低。白蛋白柱分离法原理:X和Y精子在白蛋白中泳动速度不等,Y精子速度快,穿透粘稠的白蛋白溶液能力强,在较高浓度的白蛋白溶液层中可获得更多的Y精子。电泳法原理:精子膜表面因含大量的唾液酸而使精子带负电荷,X和Y精子表面负电荷量不等,在电场中可将其分离。SephadexG50法原理:X精子头部长,宽径大于Y精子;采用SephadexG50滤过,分子筛作用可将其分离。密度梯度离心法原理:X、Y精子在分离介质中的沉降速度不等。流式细胞仪分选法原理:单个细胞悬液,经特异的活体细胞染色后放入样品管中,流经流动室时,仪器可对符合分选特性的细胞充电,再经高压静电场时发生偏转,进入指定的收集器。三.人工授精(artificialinsemination)概念:应用非性交的方法,将精子置入女性生殖道内,让精子与卵子自然结合,以达到妊娠的目的而实施的检测治疗措施。(1)自体人工授精(AIH)。(2)异体人工授精(AID)。人工授精适应证AIH适应证:男性(1)正常性交时精子不能进入女性生殖道的病症(2)精液质量异常(3)某些免疫性不育(4)生殖保险女性(1)生殖道解剖结构异常(2)生殖道生理功能异常(3)免疫因素AID适应证(1)无精子症(2)严重的少、弱精子症(3)男方患有某些不便生育的遗传性疾病(4)免疫因素人工授精时间选择时间:女方围产卵期(排卵前日,当日,后日)常用检测指标:1.基础体温(basalbodytemperatureBBT);2.宫颈黏液检测,(1)宫颈黏液拉丝实验。(2)宫颈黏液结晶实验。3.激素测定,...